414 Leopold Auerbach, 
diinnte wisserige Methylgriinlésung fiir einige Zeit, je nach der Kon- 
zentration derselben fiir eine halbe bis zu mehreren Stunden ein- 
gestellt und dann zur Beseitigung der Uberfiarbung fiir 5—15 Minuten 
in absoluten Alkohol gebracht. — Diese Methode liefert im allgemeinen 
sehr schéne Priaparate und ganz dieselben Ergebnisse wie die anderen. 
Ich habe sie indessen nur selten angewandt und kann deshalb auch 
nicht sagen, ob sie alle die vielen Hinzelheiten, auf die es ankommt, 
ebenso deutlich zeigt wie die jetzt folgenden. 
B) Saéurefuchsin und Methylgrin. 
Ba) Simultan, 
Wihrend es fiir diese Art der Doppelfarbung bei den ausgebildeten 
Samenelementen und so manchen anderen Zellen auf ein sehr genaues 
Mischungsverhiltnis der beiden Farbstoffe nicht ankommt und die be- 
ziigliche, friiher (1d) von mir angegebene Verfahrungsweise, obwohl 
sie nicht gerade exakt ist, sich dennoch als ganz ausreichend er- 
wiesen hat, so ist es hingegen nicht ganz ebenso bei spermatogene- 
tischen Untersuchungen. Ich bin aber jetzt in der Lage, eine ge- 
nauere, auch fiir diesen Zweck sich bewdhrende Vorschrift zu geben. 
Man bereite sich zwei einfache Liésungen, indem man einen Teil 
Methylgriin und ebenso einen Teil Saéurefuchsin in je 1000 Teilen 
Wasser lost. Der letzteren, némlich der roten Loésung, fiige man 
ein klein wenig Essigsiure hinzu und zwar auf je 50 g einen 
Tropfen einer 10- proz. wisserigen Eisessiglésung. Dann mische 
man 2 Teile der roten mit 3 Teilen der blaugriinen Fliissigkeit. 
Filtrieren des Gemisches ist kaum nétig; will man es aber thun, so 
benutze man ein vorher mit Methylgriin gefarbtes Filter, weil das 
Papier von diesem Farbstoff viel mehr absorbiert als vom Siure- 
fuchsin und dadurch, namentlich bei kleiner Quantitat der zu filtrieren- 
den Fliissigkeit, das Mischungsverhiltnis derselben nicht ganz un- 
_wesentlich andert.” ‘In die kombinierte Lésung wird nun die dia Pra- 
parat tragende Glasplatte fiir 5—-15 Minuten eingestellt, nachdem von 
letzterer der Alkohol méglichst beseitigt und nur das Praparat selbst 
noch etwas feucht gelassen worden ist. Es darf tibrigens auch linger, 
als angegeben, in der tingierenden Fliissigkeit verweilen, was jedoch 
meistens nicht nétig ist und die folgende Operation umstindlicher 
macht. Das notwendige Minimum der Tinktionsdauer wichst natiir- 
lich mit der Dicke der zu farbenden Schicht, bei einem Schnitte aber 
auch mit der Flachenausdehnung desselben, indem, wie aufmerksame 
Beobachtung ergiebt, die Aufnahme der Farbstoffe immer viel stiirker 
als von der freien Fliche vom freien Rande des Schnittes her erfolgt, — 
an diesem schnell sich steigert und von hier aus langsam nach der 
Mitte hin fortschreitet, so da®B eine Zeit lang ein mittleres, nur sehr 
schwach gefirbtes Feld vorhanden ist, wiihrend eine Randzone schon 
intensiv tingiert ist. Aber auch die Temperatur hat einen sehr merk- 
lichen Einfiu® und zwar derart, dai’ héhere Temperatur vorzugsweise 
die Absorption des Methylgriin beschleunigt, niedere die letztere 
