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Die Prozedur, die je nach der Größe des Objektes verschiedene 
Zeit in Anspruch nimmt, einen bis mehrere Tage, vollzieht sich am besten 
im Wärmeschrank bei 40—42°. Die Bleichungsflüssigkeit wird jein 
paarmal gewechselt. Sorgfältiges Auswaschen in Wasser. Dann werden 
die Gasbläschen entfernt (in frisch aufgekochtem Wasser, eventuell 
unter der Luftpumpe). 
Für pigmentreiche Objekte ist das Bleichen unbedingt nötig, bei 
Embryonen, für welche meine Methode ja ursprünglich ausgearbeitet 
war, ist es gewöhnlich nicht dringend notwendig, schadet natürlich 
aber nicht. 
MOoZcEJKO (Zeitschr. f. wiss. Mikroskopie u. f. mikrosk. Technik, 
Bd. 27, 1910, p. 248—256) verwendet zum Bleichen Chlorgas und 
Chlorwasser oder Chlorspiritus. Will man das Skelett nachher färben, 
läßt sich Chlor nicht verwenden. 
SPALTEHOLZ (Ueber das Durchsichtigmachen von menschlichen 
und tierischen Präparaten, Verlag von S. Hirzel, Leipzig 1911) ver- 
wendet das käufliche Wasserstoffsuperoxyd, mit Ammoniak neutralisiert 
oder schwach alkalisiert. Dies ist weniger kostspielig, aber die Nieder- 
schläge, die bei der Neutralisation oft entstehen, machen das Arbeiten 
mit dieser Flüssigkeit weniger angenehm. 
Färbung. 
Die Methoden zur isolierten Färbung des Knorpel- und Knochen- 
skelettes, die ich veröffentlicht habe, haben mir gewöhnlich vollkommen 
zufriedenstellende Resultate gegeben. Sollte einmal beim Färben sehr 
großer Objekte in neutraler Alizarinlösung das Differenzieren in 
95-proz. Alkohol Schwierigkeiten machen, d. h. das Gewebe die Farbe 
zurückhalten, so kommt man sehr schnell zum Ziel, wenn man in schwach 
essigsaurem Alkohol differenziert. Die Knochenfärbung leidet nicht 
hiervon. 
Dagegen hat mir meine Alizarin-Methylgrün-Methode zu Nach- 
einanderfärben des Knochen- und Knorpelskelettes besonders bei er- 
wachsenem Material nicht immer ganz gleichmäßige Resultate ge- 
geben. Es ereignet sich nämlich bisweilen, daß die eine oder die 
andere Färbung stellenweise verschwindet, so daß nur gewisse Teile 
des Objektes Doppelfärbung zeigen. Eine Erklärung hierzu habe ich 
bis jetzt nicht ausfinden können. Es ist dies aber ein Uebelstand, 
der vermieden werden sollte. Auch würde ja die Methode sehr ver- 
einfacht werden, wenn man eine brauchbare Simultanfärbung finden 
könnte. Solange ich mit den pastaförmigen Alizarinen arbeitete, wollte 
mir dies nie recht gelingen, aber seitdem ich das Alizarinum krystalli- 
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