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satum (Grübler) zu verwenden begann, hat sich die Aufgabe als sehr 
einfach herausgestellt. 
Man bereitet sich folgende (haltbare) Stammlösungen: 
I. Methylenblau oder Toluidinblau 0,10 g 
95-proz. Alkohol 100 ‘i 
II. Gesättigte Lösung von Alizarin in 95-proz. Alkohol 10 ccm 
1-proz. Essigsäure in 70-proz. Alkohol 9015 
Welches Methylenblau man verwendet, ist so ziemlich gleichgiiltig. 
Meistens habe ich Methylenblau BB. krystall. (Höchst) benutzt. 
Beide Lösungen können zur isolierten Färbung des Knorpel- bezw. 
des Knochenskelettes verwendet werden; bieten aber keine besonderen 
Vorteile vor meinen älteren Lösungen. 
SPALTEHOLZ empfiehlt für die Färbung der Knochensubstanz eine 
schwach essigsaure Alizarin-Spirituslésung von übrigens derselben 
Konzentration wie meine alte neutrale Lösung. Er bekommt dabei 
nur eine geringe gelbe Mitfärbung des übrigen Gewebes, die sich durch 
Alkohol viel leichter extrahieren läßt als beim Verwenden neutraler 
Alizarinlösungen. Die Färbung mit saueren Alizarinlösungen geht aber 
bedeutend langsamer als die Verwendung neutraler Lösungen, und 
wünscht man nur isolierte Färbung des Knochengewebes, so ist doch 
Färben in meiner neutralen Alizarinlösung mit Differenzieren in schwach 
essigsaurem Spiritus die schnellste Methode. Auch hat er versucht, 
die Essigsäure mit 1—2-proz. Formalin zu ersetzen, und dabei gute 
Resultate erhalten. Dies letztere hängt jedoch, meiner Meinung nach, 
nicht vom Formalin ab, sondern ausschließlich von der im käuflichen 
Formalin immer vorhandenen Ameisensäure. 
Zur simultanen Doppelfärbung mischt man unmittelbar vor dem 
Gebrauche : 
Stammlösung I 1 
" II 4 G 
1-proz. Essigsäure in 70-proz. Spiritus 5 
Färben im Thermostat bei 40—42° einen bis mehrere Tage. 
Dann Differenzieren in schwach essigsaurem Wasser und 70-proz. 
Spiritus alternierend, bis keine Farbe mehr weggeht. Der Essigsäure- 
zusatz zum Wasser braucht nicht größer zu sein, als daß das Wasser 
saure Reaktion zeigt. Verwendet man gewöhnliches, also alkalisches 
Leitungswasser, so tritt nämlich oft eine diffuse, rotviolette Verfärbung 
ein, die sich meistens nur mit Schwierigkeit entfernen läßt; oder es leidet 
zum mindesten die Knorpelfärbung durch die dann bedeutend ver- 
langsamte Differenzierung, die dann manchmal Wochen betragen kann. 
