1° Preparation de la verrerie. — Le materiel necessaire comprend 

 lesmemes objets que ceux qui ont ete indiques pour ta technique 

 precedente, a I'exception des lubes a culture qui son! different*?. 

 Les tubes employes ici sont les tubes de Molliard dont un modele a 

 ete figure dans le Memoire auquel nous avons fait allusion plus 

 haut (1). 



il est indique flans l^s torlii)i< |iif-> 



2° Montage <-l sterilisation des appareils. — Si Ton doit faire les 

 cultures sur un substratum solide immerge dans le liquide nutritif, 

 on emploie comme substratum la pierre ponce granulee (2\. On 

 introduit done dans chaque tube a culture un volume determine, 

 90 c.c. par exemple, de pierre ponce granulee prealahlement calcinee 

 ellavee. On obture l'ouverture des tubes par un tampon de coton, 

 on recouvre dun capuchon deverre, eton sterilise par chauffage au 

 four Pasteur a 170° pendant une heure. Si Ton doit utiliser un milieu 

 de culture constitue par un liquide nutritif gelose, on sterilise les 

 tubes vides apres les avoir bouches au coton et recouvert leur col 

 d'un capuchon de verre. 



Le reste de la verrerie est prepare et sterilise comme il a ete 

 indique dans les techniques precedentes. 



3° Preparation et .sterilisation des milieux de culture. — Dans le 

 cas de cultures sur substratum de pierre ponce, on emploie les memes 

 milieux que dans les techniques precedentes. Si les liquides peuvent 

 •"'ire sterilises par rhaullage h 1'aulnelave on introduit dans chaque 

 tube de culture contenant deja le substratum sterilise une quantite 

 '!«• liquide nulrilif suffisante pour recouvrir la surface de la pierre 

 ponce (60 c.c. pour 90 c.c de pierre ponce granulee), puis on sterilise 

 par chauffage a I'autoclave pendant 30 minutes a i20°. Lorsque les 

 liquides ne peuvent etre chauffes, on sterilise par filtration a la bou- 

 gie enrecevant les milieux ffltres dans des ballons a tubulure late- 

 rale effilee (Voir les techniques precedentes). 



Dans le cas de cultures sur milieux geloses, on ne peut steri- 

 liser ces milieux que par chauffage a Tautoclave, il ne faut done 



(1) M. Molliahd. Loc. cit. (Rev. gen. de Bot., p. 244, flg. 1, 1907). 



