(29) NUEVOS PROTOZIIOS PARÁSITOS 221 



preferencia alisoluta al CiUMsa, c|ue practicamos siempre, utili- 

 zando alguna vez el Lkishmann á título de rápido y expeditivo. 

 Nunca nos cansaremos de repetir las excelencias del primero. 



. Si queremos estudiar la distribución del Leishmania en el inte- 

 rior de los órganos, cortaremos pequeños bloques que, fijados y 

 endurecidos por los procedimientos clásicos (formo!, alcohol, et- 

 cétera), serán sometidos á la encastración parafínica y cortados 

 en tenues laminillas de cinco mieras de grosor. La tinción se hará 

 por los métodos anteriores ó por el violeta de genciana (Wei- 

 gert), azul alcalino (Loeffler), azul fenicado (Kuhne), ó la doble 

 coloración (Gram y eosina) ó por la triple (Gram, ácido pícrico y 

 picrocarmín de Orth), etc., etc. 



El Leishmania infantum es difícilmente cultivable y requiere 

 siempre medios especiales. El agar común, el glicerinado, agar- 

 ascitis, agar preparado con caldo de bazo de perro, agar de Ni- 

 COLLE, caldo común, caldo glicerinado, caldo de bazo, etc., han 

 sido utilizados sin obtener resultados favorables. 



RoGERS, de Calcutta, consiguió por primera vez el cultivo uti- 

 lizando la sangre esplénica citratada. Longo, de Catania, repro- 

 dujo en seguida el experimento, y lo mismo Leish.mann, M.^ckensie, 

 Christophers y Stathan, y recientemente Di Cristina y Cannata 

 sembraron en sangre de conejo adicionada con citrato de sosa 

 y colocada en matraces de anaerobios. 



Ponselle, en 1913, recomienda una mezcla, á partes iguales, de 

 sangre desfibrinada de conejo y el agar siguiente: 



Gelosa no lavada 20 gramos. 



Agua 1 . 000 c. c. 



Mathis mezcla una parte de agar nutritivo á una ó dos de san- 

 gre desfibrinada de caballo ó buey, calentando el conjunto varias 

 veces á 75° ó media hora á I20°. 



Novv y Mac-Neal, resolvieron el problema <iel cultivo de los 

 tripanosomas utilizando un medio nutritivo compuesto de 



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