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evaporación y facilitar la formación del agua de condensación. 



Los tubos se colocan en estufa á 37° y se observan á las vein- 

 ticuatro horas, para rechazar los infectados y guardar los que no 

 lo estén. Kn éstos se practican las siembras del parásito. 



Sirve para ello el producto recogido por la punción del bazo, 

 ó el jugo de la viscera autopsiada, 6 el material de un cultivo 

 anterior, ó la pequeña partícula que con el hilo de platino reco- 

 gemos del hueso trepanado de un animal infectado. 



Con el mismo hilo ó anillo de platino (ose), ó con una pipeta ca- 

 pilar, se recoge el material parasitífero — que puede ó no diluirse 

 en un poco de suero salino — y se siembra en el agua de conden- 

 sación de los tubos anteriormente preparados, colocándolos en 

 seguida en estufa con termo regulador, y manteniéndolos á 22°, 

 que es la temperatura más favorable. Los Leishinania mueren 

 generalmente á los 40° y á los 0°. 



Es práctica muy prudente la de sembrar gran número de tu- 

 bos, ya que la experiencia nos ha enseñado la facilidad con que 

 el cultivo no prende, quedando estériles nuestros esfuerzos. 



Al cabo de cuatro á ocho días de estufa á 22", si la siembra ha 

 sido fértil, aparecen los Leishmania multiplicados en el agua de 

 condensación y dotados de los caracteres que luego describire- 

 mos. Alguna vez pueden apreciarse sobre la superficie del agar- 

 sangre pequeñísimas colonias macroscópicas con ligero relieve y 

 aspecto redondeado, pero el hecho es muy raro. 



Por medio de repicajes sucesi\'os, es decir, tomando una go- 

 tila del agua de condensación de un tubo fértil, y depositándola 

 en la de otro recientemente preiJarado, puede obtenerse una 

 nueva generación de Leishmania, que en estos casos germinan á 

 los tres ó cuatro días, y repitiendo los pases, siempre con exa- 

 geradas precauciones, pueden conseguirse cultivos en serie, lle- 

 gando á repetir, con éxito, numerosas generaciones. 



Conviene hacer constar que hemos observado una estricta re- 

 lación entre el desarrollo de los Lcislimaitia y la presencia de 

 hematíes bien conservados y numerosos en el agua de condensa- 

 ción. La persistencia de glóbulos rojos íntegros, ó por lo menos 

 la abundancia de hematíes en buen estado de conservación, sin 

 hemolisis muy acentuada, y sin cleformaciones graves del estro- 



