110 LE XATURALISTE CANADIEN 



les lnicrobe^s (|ue les tissus en\ ironnants, ce (|ui les fait apparaît 

 tre plus nettement. 



Certaines couleurs agissent mieux (|uancl on y ajoute un 

 « mordant », comme la potasse étendue, le borate de soude, l'ani- 

 line, le phénol, le thymol, etc. 



Parmi les matières colorantes les plus employées, citons la 

 fuchsine, le violet de gentiane, le violet dalhia, le bleu de mé- 

 thylène, le vert de méthyle, l'hématoxyline. 



Voici comment on procède pour effectuer ces colorations : sur 

 une lamelle mince tenue horizontale à l'aide d'une pince, on 

 dépose une goutte du liquide contenant les microbes et on l'étalé 

 le plus possible à l'aide de l'aiguille de platine. Rapprochant 

 alors la lamelle d'une flamme, on attend que la surface de la 

 lamelle soit desséchée. A ce moment, on fîj'e les éléments, c'est- 

 à-dire (pie l'on coagule leur protoplasma, en passant la lamelle 

 deux ou trois fois~ dans la flamme, mais, naturellement, sans 

 que la tempétature fasse rôtir les microbes qui sont à sa surface. 

 Dans l'opération précédente, la surface microbienne doit être 

 toujours maintenue en haut pour éviter l'attouchement direct de 

 la fiamme. Après fixation, on dépose sur la lamelle une goutte 

 de matière colorante et on la laisse agir plus ou moins longtemps, 

 suivant les cas. Quand on juge la coloration achevée, on lave à 

 l'eau distillée, on laisse sécher, on traite par le xylol. Finale- 

 ment, on applique la lamelle, retournée cette fois, sur une lame 

 de verre, en les séparant par une goutte de baume de Canada. 



Pour obtenir certains détails de structure, il est souvent 

 avantageux de colorer d'abord fortement, puis de décolorer 

 ensuite. On peut ainsi différencier des espèces : les unes se dé- 

 colorent facilement, les autres difiicilement. Le procédé de déco- 

 loration le plus employé est bien connu des bactériologistes sous 

 le nom de méthode de Gram. Les microbes, fixés par un mélan- 

 ge d'alcool et d'éther, sont coloriés à la solution de thionine 

 phéniquée, puis, sans être lavés, soumis à la solution de Gram r 



loiie 1 granime 



lodure rie potassium 2 — 



Eau distillée 200 — 



