220 IX- Die Enzyme. 



parates ist nicht länger als vier Tage, bei Beachtung aller Kautelen 

 höchstens drei Wochen möglich. Diese Kautelen bestehen vor allem in 

 der genauen Beachtung der von dem betreffenden Enzym beanspruchten 

 Reaktion des Mediums, im allgemeinen ist neutrale Reaktion am besten, 

 eine leicht sauere jedenfalls viel eher angängig als eine alkalische, etwa 

 derart, daß sehr empfindliches Lackmuspapier leicht gerötet wird, wie 

 es das destillierte Wasser des Laboratoriums gewöhnlich von selbst 

 tut. Ferner muß für Aufbewahrung im Eisschrank und für ein geeignetes 

 Desinfektionsmittel gesorgt werden. Die besten sind Toluol oder Xylol, 

 Chloroform und Thymol. Zu je 100 ccm der Lösung wird zirka 1 ccm 

 Toluol zugegeben, einigemal umgeschüttelt und die Lösung bei Bedarf 

 mit Pipetten entnommen. Von Chloroform nimmt man ebenfalls im 

 Verhältnis 1 : 100, bewahre aber in sehr gut verschlossener Flasche 

 auf, weil sonst die oberen Schichten leicht an Chloroform verarmen; 

 Trübungen, welche sich mit der Zeit um die am Boden liegenden 

 Chloroformtropfen bilden, bewirken keinen Verlust an wirksamen Stoffen ; 

 bei Entnahme von Flüssigkeit rühre man nicht auf, sondern schüttle 

 erst nach Abpipettierung der gewünschten Menge wieder um. Thymol 

 trägt man zerrieben in fester Form in die Flüssigkeit ein. 



Zur Isolierung der glykolytischen Enzyme, deren Ubiquität im 

 Gewebe höherer Pflanzen Stoklasa wahrscheinlich gemacht hat, 

 geht der genannte Autor folgendermaßen vor^): 5 — 6 kg junge, frische, 

 keine Zersetzung durch Fäulnis aufweisende Pflanzensubstanz wird 

 zerkleinert und der Saft daraus unter einem Drucke von 300—400 Atmo- 

 sphären ausgepreßt. Dem so gewonnenen Safte wird ein Gemisch von 

 Alkohol und Äther zugesetzt, worauf ein an Eiweißstoffen reicher Nieder- 

 schlag zu Boden fällt. Diese Operation geschieht in einem hohen, steri- 

 lisierten Zylinder. Auf 500 ccm des zellfreien Saftes kommen 600 ccm 

 eines Gemisches von 400 ccm Alkohol und 200 ccm Äther. Nach einem 

 Augenblicke setzt man Äther im Überschuß zu und hebert die oberhalb 

 des Niederschlages aus Alkohol und Äther bestehende Flüssigkeit sofort 

 ab. Nun wird neuerdings Äther aufgegossen und sodann sofort die 

 überstehende Flüssigkeit ab gehebert. Der ganze Vorgang der Fällung 

 des Pflanzensaftes muß möglichst rasch vorgenommen werden, weil 

 Alkohol und Äther bei längerer Berührung mit dem gefällten Enzym 

 dessen Aktivität schwächen würden. Die Flüssigkeit wird daher nach 

 dem Abhebern oder Abgießen sofort vollständig filtriert, was man durch 

 Verwendung von feiner Kolierleinwand und Abpressen durch dieselbe 

 am besten zustandebringt. Das so gewonnene Rohenzym wh'd in luft- 

 verdünntem Räume über Schwefelsäure getrocknet. Mit 6 — 10 g dieses 

 Enzyms wurden dann zur Prüfung seiner Wirksamkeit 50 ccm einer 

 1 5 prozentigen Traubenzuckerlösung unter Zusatz von 0,5 K3PO4 mit 

 aseptischen Kautelen und unter Zusatz von Thymol zusammengebracht 

 imd dann der Verlust an Zucker sowie die gebildeten Produkte be- 

 .stimmt. 



Von den lipoly tischen Enzymen der Pflanzen sind die Methoden 

 der Darstellung und die Prüfungsverfahron für das fettspaltende Enzym 

 der Rizinussamen ausgearbeitet, welches bekanntlich in der Technik 

 der Seifenfabrikation Verwendung findet. Der geschälte oder auch 



^) J. Stoklasa, A. Ernest, K. Chocensky, Über die glykolytischen 

 Enzyme im Pflanzenorganismus, Ztschr. f. phyeiol. Chem. 50, 303 (1907). 



