IX. Die Enzyme. 221 



ungeschälte Rizinussamen wird in einer Mühle mit Wasser fein ver- 

 mählen; nachdem die Samenmilch eine Zentrifuge passiert hat, welche 

 alle lipolytisch nicht wirksamen Bestandteile des Samens zurückhält, 

 verläßt das Enzym als Emulsion den Apparat; die Emulsion ent- 

 hält neben dem größten Teil des Rizinusöls, fein damit emulsioniert, 

 die unlöslichen Eiweißstoffe des Plasmas, darunter auch die Lipase, 

 während das Emulsionswasser alle wasserlöslichen Bestandteile, dar- 

 unter auch das säurebildende Enzym, aufgenommen hat. Diese zentri- 

 fugierte Fermentmilch wird nun bei zirka 24 ° C der Gärung überlassen, 

 wobei sich die fermenthaltige Emulsion als dicker Schaum an der Ober- 

 fläche des sauren Unterwassers absetzt und so leicht gewonnen werden 

 kann. Die Lösung enthält außer der Lipase noch 38 % Rizinusölsäure, 

 4 % Eiweißkörper und andere feste Substanzen und 58 % Wasser^). Das 

 Enzym wird am besten durch Essigsäure, Milchsäure oder Buttersäure 

 aktiviert, wenn diese in nicht zu starkem Überschuß vorliegen; in diesem 

 Falle sind hinlänglich Säuren zugegen, und zur Aktivierung braucht 

 man nur für kleine Zusätze von ManganoxydulsuKat (0,15 — 0,5 g 

 per 100 g Samenöl) zu sorgen. Das Ferment ist bei steriler, kühler Auf- 

 bewahrung einige Zeit haltbar, indessen nimmt seine Wirksamkeit be- 

 ständig ab : so wurde von der Rizinuslipase Leinöl noch nach 5 Tagen 

 im Betrage von 75 % innerhalb 20 Stunden gespalten, nach 13 Tagen 

 zu 74 %, nach 26 zu 72 %, nach 56 Tagen zu 67 %, nach 107 Tagen 

 zu 55 % und nach 15 Monaten noch zu 44 %, also immerhin eine lang- 

 dauernde Wirksamkeit. Iwanow 2) zerrieb zur Gewinnung von Lipase 

 trockene, unreife Ölsamen mit Sand und Glyzerin. Der dabei entstehende 

 dicke Brei wurde während 24 Stunden digeriert, um die Fermente voll- 

 kommen in Lösung zu bringen. Dann wurde der Glyzerinauszug ab- 

 gepreßt und mit dem gleichen Volumen reiner Ölsäure vermischt. Waren 

 die Samen frisch und saftig, so war ein Zusatz von Wasser unnötig, 

 sonst wurden stets 1 — 2 ccm Wasser zu dem Sand- Glyzeringemisch 

 zugefügt, wobei aber der Wassergehalt der Ölsäure- Glyzerinmischung 

 nie höher als auf 8 — 10 % stieg. Die Samen wurden stets im Stadium 

 intensivster Ölbildung gewählt. Die Mischung wurde nur umgerührt 

 und nach Zusatz von 2 — 3 Tropfen 10 prozentigen Thymols ruhig stehen 

 gelassen. 



Die in der Pflanzenzelle tätigen proteolytischen Fermente hat man 

 sowohl im ruhenden Keim wie in gekeimten Samen untersucht. 

 Aron und Klempin^) schlugen folgenden Weg ein, um die Fermente 

 aus Hafer zu isolieren: Geschroteter Hafer wurde 10 — 12 Stunden in 

 der Kugelmühle in einem Gemisch gleicher Teile Wasser und Glyzerin 

 gründlich zer mahlen, der feste Rückstand in einer Filterpresse ab- 

 gepreßt und das ablaufende Filtrat in hohen Zylindern durch Sedi- 

 mentieren geklärt. Die darauf abgeheberte braungelbe Flüssigkeit 

 wurde schließlich noch mehrmals filtriert. Der Glyzerinextrakt, welcher 

 sich auch nach wochenlangem Aufbewahren im Eiskasten proteolytisch 



^) E. Hoyer, Über fermentative Fettspaltiing , Ztschr. f. physiol. Chem. 

 50, 414 (1907). 



2) S. Iwanow, Über den Stoffwechsel beim Reifen ölhaltiger Samen usw., 

 Beih. z. bot. Centr.-Bl. 28, 159 (1911). 



^) H. Aron und P. Klempin, Studien über die proteolytischen Enzyme 

 usw., Bioch. Ztschr. 9, 163 (1908), nach M. Jacoby, in Abderhaldens 

 Biochem. Arbeitsmethoden III, 1, 413. 



