IX. Die Enzyme. 239 



Peroxydase. Die Lakkase ist meistens mit Tyrosinase vereinigt, von 

 der sie sich durch Erwärmen auf 60 — 65 " trennen läßt. Um die Rein- 

 heit des Lakkasepräparates zu prüfen, setzt man zu einer 0,5 — 1 prozen- 

 tigen p-Kresollösung einige Kubikzentimeter der Lakkaselösung und 

 verteilt die Mischung in vier Eprouvetten. A enthält die genannte 

 Mischung, B dieselbe mit Zusatz einer Spur Essigsäure bis zur schwach 

 sauren Reaktion, C ist mit ganz wenig Sodalösung alkalisch gemacht,. 

 D mit Spuren von Glykokoll alkalisch. Ist nur Lakkase, aber keine 

 Spur Tyrosinase zugegen, so wird A milchig weiß, B ebenfalls mit 

 stärkerer Trübung, C und D reagieren viel schwächer. Ist Tyrosinase 

 zugegen, so färben sich C und D gelb, respektive rot. 



Von Tyrosinase rührt die Schwarzfärbung der Säfte von Kar- 

 toffel, Vicia Faba usw. her. Setzt man von solchen Säften etwas zu einer 

 1 promilligen bis 1 prozentigen p-Kresollösung zu, nachdem man den 

 Saft durch Sodazusatz ganz schwach all^alisch gemacht hat, so geht 

 die farblose Lösung in Gelb, Orangegelb und schließlich in Rot über, 

 bei anfänglichem Zusatz von einer Spur Glykokoll tritt sofort Rot- 

 färbung auf. Zur Darstellung kann man von Kartoffelschalen ausgehen, 

 von denen einige Kilo nach Befeuchten mit Alkohol mittels einer Hack- 

 maschine zu einem dicken Brei zerrieben und so rasch als möglich ab- 

 gepreßt werden. Man läßt den bräunlich gefärbten Saft direkt in ein 

 Glasgefäß fließen, das zur Hälfte mit starkem Alkohol gefüllt ist. Den 

 voluminösen Niederschlag läßt man absetzen, die klare alkoholische 

 Flüssigkeit wird mittels eines Hebers entfernt, der Bodensatz auf ein 

 Filter gebracht und noch feucht mit der nötigen Menge destillierten 

 Wassers unter Zusatz von Toluol einen Tag stehen gelassen; hierauf 

 wird filtriert und die klare Flüssigkeit mit starkem Alkohol versetzt, 

 der Niederschlag, der sich zu Boden setzt, durch Dekantieren von der 

 Flüssigkeit befreit, der Rückstand auf ein kleines Faltenfilter ge- 

 bracht, mit Alkohol gewaschen und noch feucht auf porösen Tontellern 

 über Schwefelsäure im Vakuum rasch getrocknet. Dieser trockene 

 Rückstand löst sich vollkommen in Wasser, oxydiert sich nicht an der 

 Luft, enthält keine Lakkase, bläut also Guajakemulsion nicht, wohl 

 aber Peroxydase, da er Guajak auf Zusatz von Wasserstoffsuperoxyd 

 sofort bläut. Wässerige Lösungen von Tyrosinase halten sich selbst bei 

 Zusatz von Toluol nur einige Tage mit unveränderter Wirksamkeit. 



Die Messung der oxydativen Kraft der Tyrosinase geschieht nach 

 Bach^) folgendermaßen: In eine Reihe von acht Bechergläsern gibt man 

 je 10 ccm 0,05 prozentiger Tyrosinlösung und 0,04 % Natriumkarbonat 

 hinzu, ferner je steigende Mengen Fermentlösung und Wasser bis zu 

 50 ccm. Die Reaktionsgemische werden 24 Stunden bei Zimmertemperatur 

 stehen gelassen, dann mit je 1 ccm 10 prozentiger Schwefelsäure an- 

 gesäuert und mit — ^- Permanganatlösung bis zur Entfärbung titriert; 



gleichzeitig wird in einer zweiten Reihe von Gläsern die Wirkung nach 

 48 Stunden bestimmt. 



Fermentkonzentration 0,5 

 A 24 Stunden 10,8 

 B 48 Stunden 13,2 



") A. Bach, Über die Wirkung der Tyrosinase Ber. d. d. ehem. Ges. 41, 

 221 (1908). 



