IX. Die Enzyme. 241 



Zeit hindurch andauernden perhydrolzerstörenden Wirkung des Enzyms 

 zurückgeblieben war. Die Bestimmung des nach unterbrochener Katalase- 

 arbeit zurückgebhebenen Wasserstoffsuperoxyds kann z. B. mit Kalium- 

 permanganat in saurer Lösung vorgenommen werden. Ich zitiere diese 

 Bestimmung nach den Angaben von Gräfe und Linsbauer: Der 

 in der Achatreibschale ohne Zusatz eines zerreibenden Mediums be- 

 reitete Organbrei wurde mit einer bestimmten Menge Chloroformwassers 

 vermischt, über ein möglichst kleines Filter in eine Schüttelf lasche 

 filtriert und über dasselbe Filter die abpipettierte Menge Wasserstoff- 

 superoxyd gegossen. Das verwendete Wasserstoffsuperoxyd war auf 



— eingestellt und aus reinem Merck sehen Perhydrol durch Ver- 

 dünnung hergestellt. Nach einer bestimmten Zeit wurde im Filtrat 

 die Arbeit der Katalase durch Zugabe einer bestimmten Menge kon- 

 zentrierter Schwefelsäure unterbrochen und darauf sofort die Titration 

 vorgenommen. Je nach Bedarf wurde auch das Filtrat in aliquote Teile 

 geteilt und diese in bestimmten Zeitintervallen titriert, um die Wirkungs- 

 weise des Fermentes durch eine längere Zeitperiode hindurch verfolgen 

 zu können. Die Permanganatlösung wurde mit reiner Oxalsäure in der 



in 

 gewöhnlichen Weise eingestellt, in der Stärke — ^ verwendet imd beide 



Lösungen in angemessenen Intervallen gegeneinander nachgeprüft. Der 

 erste Tropfen, welcher etwa eine halbe Minute bleibende Rosafärbung 

 in der titrierten Lösung verursachte, wurde als Kriterium für Be- 

 endigung der Titration genommen. Diesem Verfahren haften insofern 

 Ungenauigkeiten an, als einerseits der Pflanzenpreßsaft von vornherein 

 nicht farblos, sondern mehr oder weniger gelblich erhalten wird, ander- 

 seits die anfängliche Rosafärbung nach schembarer Beendigung der 

 Titration bei energischem Umschüttehi verschwindet, nachdem sie 

 mehrere Sekunden angehalten hat, da ja die zahlreichen organischen 

 Komponenten des Saftes die Maßflüssigkeit erst nach und nach redu- 

 zieren, so daß bisweilen eine wirklich bleibende Rosafärbung erst nach 

 mehreren Stunden Schütteins und Weiter titrieren s erhalten wird. Es 

 müßte also auf den ersten sichtbaren, durch ganz bestimmte Zeit 

 bleibenden Umschlag gearbeitet werden. 



Diese Unsicherheit ist durch Verwendung der von A. J o 1 1 e s 

 vorgeschlagenen Jodaklimethode zum Teil vermieden. Das Wasserstoff- 

 superoxyd vermag aus Jodkalilösungen in salzsaurer Lösung die äqui- 

 valente Menge Jod frei zu machen, welches dann mit Natriumthiosulfat 

 unter Verwendung von Stärkekleister als Indikator zurücktitriert werden 

 kann. Zu dem mit Chloroformwasser filtrierten Preßsaft, in welchem 

 die Katalase eine bestimmte Zeit auf die zugefügte Perhydrolmenge 

 gewirkt hatte, wurde zur Beendigung der Reaktion konzentrierte Salz- 

 säure, hierauf 10 ccm einer 10 prozentigen, jederzeit frisch bereiteten 

 Jodkalilösung hinzugegeben und das ausgeschiedene Jod mit Thio- 

 sulfatlösung titriert. Die letztere war in üblicher Weise mit Kalibijodat 

 so eingestellt, daß 10 ccm der verwendeten Wasserstoff superoxydlösung 

 ungefähr so viel Jod aus einer 10 prozentigen Jodkalilösung in Freiheit 

 setzten, daß von demselben etwa 15 ccm verbraucht wurden, und wurde 

 von Zeit zu Zeit kontrolliert. Die verwendeten Büretten waren eng 

 und gestatteten die Ablesung von ^/^o ccm. Die verwendeten Keimlinge 



Gräfe, Ernährungsphys. Praktikum. 16 



