242 



IX. Die Enzyme. 



wurden im Glashaiise unter Deckelsturz aufgezogen und alle notwendigen 

 Operationen bis zur Titration in der Dunkellvammer ausgeführt. Die 

 Pflanzenteile wurden in einer kleinen Achatreibschale mit Chloroform- 

 wasser zerrieben und mit emer entsprechenden Menge der Perhydrol- 

 lösung über ein kleines Filter m eine Schüttelflasche filtriert. Nach 

 einer bestimmten Zeit wurde die Katalasearbeit durch Eingießen von 

 10 ccm konzentrierter Salzsäure zum Stillstande gebracht, 10 ccm der 

 Jodkahlösung hinzugefügt und nach einer Minute fortgesetzten Uni- 

 schüttelns titriert. Das sofortige Titrieren hatte sich als notwendig er- 

 wiesen, da wir beobachten konnten, daß der gelbe Farbenton der Probe 

 mit der Zeit nachdunkelte, also offenbar neben der Katalase, welche 

 ja durch die Salzsäure in ihrer Tätigkeit unterbunden war, noch Stoffe 

 im Extrakt der Reibmasse vorhanden sein mußten, welche diese suk- 

 zessive Jodausscheidung bewirken. 



Man kann die Stärke einer Katalase] ösung genauer 

 durch Messung des entwickelten Sauerstoffs bestimmen. 

 In ein mit Mohr scher Bürette versehenes Gefäß mit 

 doppelten Hähnen und Röhren gießt man 5 bis 10 ccm 

 der Katalaselösung ; dann läßt man durch Offnen eines 

 Hahnes 30 ccm einer 1 prozentigen Wasserstoffsuperoxyd- 

 lösung zufheßen. Die sich entwickelnde Sauerstoffmenge 

 wird mittels Eudiometers nach 1, 2, 5, 10 Minuten ge- 

 messen. Ist die bestimmte Zeit verflossen, so wird der 

 zum Eudiometer führende Hahn geschlossen und durch 

 Senken der Quecksilberkugel das Niveau äquilibriert. 

 Der hier gut verwendbare Apparat von Liebermann i) 

 hat folgende Einrichtung (Fig. 75) : In die Abteilung A 

 (Fassungsraum zirka 25 ccm) kommen mit Hilfe einer 

 Pipette nach Entfernung des bei E eingeschliffenen 

 Manometerrohres D und bei geschlossenen Hähnen a, c 

 und d 5 ccm emer verdünnten Fermentlösung; hierauf 

 wird der Hahn auch bei b geschlossen und der Apparat 

 umgekehrt. Dann werden bei geschlossenen Hähnen e 

 und / bei F 5 ccm einer 1 prozentigen Wasserstoffsuper- 

 oxydlösung in die Abteilung B gebracht (Fassungsraum 

 zirka 25 ccm), worauf Hahn g geschlossen wird. In die 

 Abteilung C (Fassungsraum zirka 25 ccm) kommen nun 

 5 ccm einer gesättigten Kochsalzlösung, worauf auch Hahn h geschlossen, 

 der Apparat wieder umgekehrt und auf passende Art in ein Stativ ge- 

 klemmt wird. Nun wird das sowohl nach aufwärts wie nach abwärts 

 von Null in MiUimeter geteilte, bis Null mit Quecksilber gefüllte Mano- 

 meterrohr D aufgesetzt. Die Hähne i und b werden zum Druckausgleich 

 geöffnet, dann wird i wieder geschlossen ; die Hähne b, a, g und h sind 

 mit 1 cm weiten Bohrungen versehen, um den Flüssigkeiten raschen 

 Durchfluß zu gestatten. Das Manometerrohr ist, soweit die Millimeter- 

 tcilung (100 mm nach auf- und abwärts) reicht,, genau kalibriert,, so 

 daß das Vohimen in Kubikzentimetern für jeden Millimeter aus der 

 Kalibrierungstabelle abgelesen werden kann. Mischen sich die beiden 

 Flüssigkeiten bei geöffnetem Hahn a in der Abteilung B und findet 



Fig. 75. Lieber- 

 manns Apparat. 



•) L. Li eher mann, Beiträge zur Kenntnis der Fermentwirkungen, Pflügers 

 Archiv 104, 179 (1904). 



