IX. Die Enzyme. 243 



Gasentwicklung statt, so steigt das Quecksilber im Manometer, und es 

 kann nun für jede beliebige Zeitdauer des Versuches das Volumen des 

 entwickelten Gases bestimmt werden, wenn man es auf gleiche Tem- 

 peratur und gleichen Druck reduziert. Die Abteilung C dient dazu, 

 einer Übersättigung mit Gas vorzubeugen, und wird mit gesättigter 

 Kochsalzlösung beschickt. Durch Öffnen von g wird die Flüssigkeit 

 aus B hereinfließen gelassen, wodurch eine vollkommenere Mischung 

 und ein Entfernen der an den Wänden haftenden Gasblasen bewirkt 

 wird. Aber die volumetrische Methode hat den Nachteil, eine Über- 

 sättigung mit Sauerstoff zu bewirken, da das Gefäß nicht geschüttelt 

 werden kann, ohne durch den Einfluß der Gefäßwandungen einen un- 

 berechenbaren Faktor in die Versuchsmethodik einzubringen. So kann 

 man auch hier keine absoluten, sondern nur Vergleichs werte erhalten. 

 Bessere Erfolge erzielt man nach C h o d a t mit der Titration durch 

 verdünnte Kaliumpermanganatlösung, aber auch nur dann, wenn man 

 die Katalase selbst darstellt, z. B. durch Extraktion von Tabakblättern 

 mit chloroformhaltigem Wasser und Fällen durch Zusatz von über- 

 schüssigem Ammoniumsulfat; der Niederschlag wird von der darüber- 

 stehenden Flüssigkeit abfiltriert und durch Dialyse von dem vor- 

 handenen Ammoniumsulfat befreit; er erweist sich nach O. Loew 

 als stark katalaseh altig. Solche Katalasepräparate enthalten in ihrer 

 verdünnten Lösung nur so geringe Spuren organischer Substanz, daß 



sich ihre katalytische Kraft durch Titration mit ^^ KMnO^-Lösung 

 messen läßt, da die Reaktionsgeschwindigkeiten der Zerlegung von 

 sehr verdünnten I . — 1 Lösungen von Wasserstoffsuperoxyd der Ferment- 

 konzentration nach S e n t e r proportional ist. Zur Probe müssen die 

 verwendeten 100 — 400 ccm der Fermentlösung in großen (Liter) Flaschen 

 mit Glasstöpsel einige Stunden in schmelzendem Eis vorgekühlt und 

 darauf 100 — ^400 ccm vorgekühlte Wasserstoffsuperoxydlösung dazu- 

 gegossen werden. Von der peinlich auf ^ gehaltenen Flüssigkeit werden 

 zeitweise je 25 — 100 ccm zur Probe entnommen, zur Unterbrechung der 

 Reaktion in verdünnte Schwefelsäure gegossen und darauf mit der 



~^- Permanganatlösung titriert. Ich habe schon darauf hingewiesen. 



daß man sich von der viel langsamer als das Peroxyd auf Permanganat 

 wirkenden organischen Substanz des Zellsaftes emanzipieren kann, 

 wenn man nicht die dauernde^ sondern die eine halbe Minute beständige 

 Rosafärbung als Ende der Reaktion betrachtet. 



Die kolorimetrischen Methoden, z. B. Intensität der Bläuung von 

 Guajakemulsion, wie sie bisweilen zur Messung der katalytischen Kraft 

 bei Peroxydasen verwendet werden, sind höchst unzuverlässig. Vor 

 allem muß die Intensität der Färbung durchaus nicht der Intensität 

 in der Oxydation der farblosen Verbindung parallel gehen, so nimmt 

 z. B. Guajakharz bei der Oxydation eine blaue Färbung an, die aber 

 bei weitergehender Oxydation von einem gewissen Punkt an wieder 

 abnimmt; die Färbungen der einzelnen Substanzen, wie Guajak, Kresol 

 usw., sind in ihrer Intensität nicht untereinander vergleichbar, ferner 

 sind die Pflanzensäfte nur selten klar und farblos, meistens trüb und 

 mißfarbig, so daß die oxydierende Fällung nicht gleichmäßig vor sich 



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