244 



IX. Die Enzyme. 



r:::^ 



geht lind die Färbung nicht deiitUch zu erkennen ist. Der Vergleich 

 mit künstlich hergestellten, von Suspensionen freien Farblösungen ist 

 aber höchst unexakt. Was also ein Postulat für solche Bestimmungen 

 wäre, ist eine Methode, welche mit frischen Säften, wie sie aus den 

 Pflanzengeweben eben bereitet werden, zu arbeiten gestattet und bei 

 welchen die Genauigkeit auch mit größeren Extraktmengen hinlänglich 

 ist. Die von Bach und C h o d a t beschriebene, auf der Wägung 

 des entstandenen Purpurogallins basierende Arbeitsweise ist wohl ver- 

 läßhch, aber etwas langwierig; nach Foä ist die befriedigendste Methode 

 der Messung der Reaktionen, welche Absorption von Sauerstoff bewirken, 

 die, in welcher die Menge des absorbierten Sauerstoffs durch Messung 

 der Druckänderung im Reaktionsgefäß bestimmt wird. Da die Oxydasen 

 katalytisch wirken, d. h. eine Reaktion beschleunigen, ohne selbst dabei 

 verbraucht zu werden und dabei eine in keinem Verhältnis zu ihrer 

 Menge stehende Stoffquantität umsetzen, kann man bei ihnen am besten 



den Grad messen, in welchem sie gewisse 

 Oxydationen beschlexuiigen, um ihre Wir- 

 kungsintensität kennen zu lernen. H. 

 M B u n z e P) hat eine solche Methode aus- 

 gearbeitet, in welcher die Arbeit des Enzyms 

 unter sorgfältig konstant gehaltenen Außen- 

 bedingungen vor sich geht, und bei welcher 

 die Menge des absorbierten Sauerstoffs ge- 

 messen wird; immerhin mußte zunächst, 

 da die Peroxydase nicht beliebige, sondern 

 in bestimmter Quantität nur ganz be- 

 stimmte und nicht allzugroße Mengen Pyro- 

 gallol oxydiert, die Beziehungen zwischen 

 Stärke des Oxydasepräparates, dem Betrage 

 der Sauerstoff ab Sorption und der Art und 

 Weise derselben festgestellt werden. Bei 

 einer solchen Manometermethode muß na- 

 türlich die Temperatur vollkommen kon- 

 stant gehalten werden, d. h. sie darf nicht 

 um mehr als um Zehntelgrade schwanken, 

 und diese Bedingungen müssen schon eine Zeitlang vor Beginn des 

 Versuches herrschen und zwar sowohl wegen des Verlaufes der Enzym- 

 arbeit selbst als wegen der Manometerablesung, die Manometer- 

 schwankungen dürfen nur durch den absorbierten Sauerstoff, nicht aber 

 durch die Differenzen zwischen diesem und der ausgegebenen Kohlen- 

 säure hervorgerufen sein, die Kohlensäure muß also sofort aus dem 

 Reaktionsraume entfernt werden, und ihr Betrag ist zu messen, da er 

 auch Anhaltspunkte für die Aufnahme von Sauerstoff geben kann. 



Diesen Forderungen entspricht der von B u n z e 1 konstruierte 

 und mit besonderen elektrischen, der Heizung, der Luftbewegung und 

 der Kühlung dienenden Vorrichtungen versehene Thermostat. Indem be- 

 züglich dieser Einzelheiten auf die Originalabhandlung verwiesen sein 

 mag, soll hier nur der Peroxydaseapparat und die Methode beschrieben 

 werden. Der Apparat (Fig. 76) besitzt einen Fassungsraum von 150 ccm. 



Fig. 76. Bunzels Peroxydaseapparat. 



') H. 13 u n z o 1 , The measurement of tho oxidase content of plant juices. 

 U. S. Department of Agriculture Bull. No. 238 (1912). 



