IX. Die Enzyme. 



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Die Einschnürung bei D teilt den unteren Teil in zwei Räume, A und B. 

 In den Raum A kann aus der 2-ccm-Bürette F vermittels des Hahnes C 

 Flüssigkeit eingefüllt werden. Der Raum B kann aus der Birne G, 

 mit einem Inhalt von 8 ccm durch den Hahn und die Röhre E oder 

 durch Abheben des eingeriebenen Teiles bei K gefüllt werden. Die 

 Röhre trägt ein kleines, etwa 10 ccm fassendes Glaskörbchen H, 

 welches einen ausgebauchten Rand besitzt, damit beim Schütteln keine 

 Flüssigkeit herausspritzen kann; es ist auch hinlänglich weit vom Boden 

 des Gefäßes entfernt, daß kein Wasser hineingelangen kann. Diese Vor- 

 sicht ist sehr wesentlich, da eine durch Mischung von Pyrogallol und 

 Alkah hervorgerufene Sauerstoffabsorption die Manometerablesung un- 

 zuverlässig machte. Das Manometer M ist in Millimeter ein- 

 geteilt; durch Schließen des Hahnes J kann es außer Verbin- 

 dung mit dem Apparat gesetzt werden. Dieser Apparat ist 

 standfest geblasen. Um den Inhalt des Körbchens zu titrieren, 

 wurde ein Titrationsgefäß (Fig. 77) benützt, in welchem alle 

 Titrationen in einer kohlensäurefreien Atmosphäre ausgeführt 

 wurden, zu welchem Zweck der Boden des Gefäßes mit einer 

 30 prozentigen Kalilauge bedeckt war. Der 

 den Korb tragende Schliff wird durch den breiten 

 Kautschukstöpsel R ersetzt. Die in Zehntel ge- 

 teilte Bürette B kann in den Schliff bei G ein- 

 gesetzt werden, so daß ihre Mündung sich gerade 

 oberhalb des Körbchens befindet. Die kleine Birne 

 C ist durch einen Schliff mit der Bürette verbun- 

 den und mit einem Wattestöpsel zur Abhaltung 

 von Verunreinigungen versehen. Als Peroxydase 

 wurde die aus Kartoffelschalenpreßsaft und als 

 oxydable Substanz Pyrogallol verwendet. Nach- 

 dem der Oxydaseapparat im Thermostaten auf- 

 gestellt ist, werden 8 ccm 0,1 — 1 prozentiger 

 PyrogaUollösung in die Abteilung B aus der 

 Birne G gebracht. 2 ccm des Pflanzensaftes 

 werden aus der Bürette F in die Abteilung A ab- 

 gemessen. Das Körbchen H wird mit 1 ccm 

 71 -Natronlauge beschickt. Der Hahn E am Oxy- 

 daseapparat wird geschlossen, während C und J 

 geöffnet sind. Der Thermostat wird geschlossen 

 und die Schüttelmaschine, welche den Oxy- 

 daseapparat sanft rüttelt, in Bewegung ge- 

 setzt, worauf die Reaktion gleich einsetzt. Nach 10 bis 20 Minuten 

 langem Schütteln wird immer behufs Manometerablesung das Schüt- 

 teln unterbrochen, und die Reaktion wird so lange vor sich gehen 

 gelassen, bis kein Sauerstoff mehr absorbiert wird, was beiläufig 

 zwei Stunden dauert. Nun wird der Behälter geöffnet, der Oxydase- 

 apparat aus den Klammern, die ihn während des Schütteins festgehalten 

 hatten, befreit und die Hähne C und E geöffnet. Der innere Teil des 

 eingeschliffenen Satzes mit dem Körbchen wird sorgfältig heraus- 

 genommen, das Glaskörbchen wird rasch an der Außenseite abgetrocknet, 

 2 Tropfen Phenolphthalein zu der Lauge hineingegeben und dann der 

 Korb sofort in den weiten Hals des Titrierapparates befestigt. Die 



Bürette wird mit j^ Schwefelsäure gefüllt und die Flüssigkeit im Körbchen 



Fig. 77. Titrationsapparat. 



