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in eine siedende Mischung von konzentrierter Salzsäure und Isatin 

 eingetaucht, so geht das Indican in Indigrot über und dieses setzt 

 sich gleichfalls im Plasma in Form roter Kristallnadeln ab. Das 

 Indican hat daher nach Beijeeinck ausschließlich seinen Sitz im 

 Plasma. 



b) Werden mikroskopische, lebende Schnitte in eine Indican- 

 lösung (Dekokt von Indigofera oder Polygonum) getaucht, so werden 

 sie in kurzer Zeit schwärzlich-blau, und die mikroskopische Unter- 

 suchung lehrt, daß sich das Indigblau nur in den Chlorophyllkörnern 

 des grünen Mesophylls und in den Schließzellen der Epidermis nieder- 

 schlägt. Tötet und extrahiert man aber die Schnitte vorher mit Alkohol, 

 so breitet sich das Enzym in der Zelle aus, und wenn dann die 

 Schnitte in eine Indicanlösung getaucht werden, so färben sie sich gleich- 

 mäßig intensiv blau. Daraus schließt Beijeeinck, daß das Ferment 

 seinen Sitz ausschließlich in den Chromatophoren hat, und dasselbe 

 gilt nach ihm auch für das Ferment des Waids, der Isatase, die die 

 Spaltung der Indoxylverbindung bewirkt^). 



Ich habe hier die Anschauung Beijeeincks über die Lokalisierung 

 des Indicans und des Ferments wiedergegeben, ich bemerke aber, 

 daß ich bei Wiederholung seines unter a) geschilderten Versuches ge- 

 funden habe, daß ich nicht bloß das Plasma, sondern auch die Chloro- 

 phyllkörner, und diese sind nicht selten, intensiv blaugefärbt gesehen 

 habe. Daher dürfte wohl über die Verteilung des Indicans und des 

 zugehörigen Fermentes innerhalb der Zelle noch nicht das letzte 

 Wort gesprochen sein. 



Leake (I) führt den mikrochemischen Nachweis des Indicans in 

 folgender Weise durch, die leider sehr umständlich ist. 



Kleine Gewebestücke oder Schnitte werden in eine Mischung von 



Eisessig 2 ccm 



Konz. Schwefelsäure .... 1 ,, 



Ammoniumpersulfat 0,5 g 



Wasser 100 ccm 



eingelegt und hier gewöhnlich 4 — 6 Stunden oder, wenn notwendig, höchstens bis 

 12 Stunden belassen, bis sie von der Flüssigkeit vollständig durchdrungen sind. Dann 

 wird das Material in täglich gewechseltem 50proz. Alkohol 3 — 4 Tage lang gewaschen, 

 in Paraffin eingebettet und geschnitten. Die Schnitte werden nach Behandlung mit 

 Xylol und abs. Alkohol für 12 Stunden in eine Mischung von Hämatoxylin und Eosin 

 (Delafields Hämatoxylin 50 ccm und Wasser 300 ccm) und dann solange in sauren 

 Alkohol (Iproz. HCl in 50 % Alkohol) eingelegt, bis sie dem freien Auge farblos er- 

 scheinen. Nun werden die Schnitte, um den Alkohol und die Säure zu entfernen, mit 

 Wasser gewaschen, für mindestens 1 Stunde in eine Iproz. Lösung von GRÜBLERschem, 

 wasserlöslichen Eosin gebracht, rasch mit Alkohol entAvässert, in Xylol überführt und 

 endlich in Balsam eingeschlossen. Ich glaube nicht, daß diese überflüssig umständ- 

 liche Methode gegenüber den früher erwähnten einen Fortschritt bedeutet, auch möchte 

 ich bezweifeln, daß sich gerade dieses Verfahren, bei welchem die Zelle sicherlich stark 



1) Aus einer Stelle bei Beijerinck (IV, 502) scheint hervorzugehen, als ob ich 

 die Hypothese aiifgestellt hätte, daß das Indican in naher Beziehung zur Cüj-Assi- 

 milation im C'hlorophyllkorn steht. Das ist aber nicht richtig, denn ich habe nur 

 die Möglichkeit einer solchen Beziehung angedeutet und auch ihre Unwahrschein- 

 lichkeit ausdrücklich betont (Molisch VIII, 232). 



