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tesoura, successivamente em sublimado- 

 alcool c em ZENKER-formol (sem acido 

 acético), que foram os fixadores usados 



A inclusão foi feita em parafina e os 

 «T-órles foram corados pelo methodo de 

 GIEMSA a húmido (fixação em sublima- 

 do-alcool) e pela hematoxilina-eosina (ti- 

 xaçâo em ZENKI£R-formol). 



Em alguns casos o material foi fixa 

 do unicamente em ZENKER-formol, sen- 

 do que, então, as preparações pelo GIEM- 

 SA a húmido não eram tão favoráveis ao 

 «sludo quanto as coradas pela hemato- 

 xilina-eosina. Noutros casos, o fixador 

 ■exclusivo foi o sublimado-alcool; aqui, 

 a par de bellas preparações pelo GIEMSA 

 a húmido, obtivemos bons preparados 

 pela hematoxilina-eosina; o tempo de co- 

 loração na hematoxilina de HANSEN não 

 diluida, não deve então, exceder de um 

 minuto. 



Notamos que a retracção dos tecido* 

 <é mais pronunciada no material fixado 

 «m sublimado-alcool que no fixado em 

 ZENKER-formol. 



E' portanto muito vantajoso o em- 

 prego conjuncto dos 2 fixadores e proces- 

 sos de coloração, sendo dos mais instruc- 

 tivos o estudo comparativo das prepara- 

 <çOes assim obtidas. 



Empregamos também, em determi- 

 nadas condições (pesquiza de fibrina, 

 identificação das cellulas do retículo) va- 

 rios methodos geraes (methodos de M.\L- 

 LORY pelo azul de anilina e hematoxi- 

 lina — acido phosphotungstico, V. GIE- 

 SON etc). 



A maioria dos animaes foi immunisa- 

 da por via endovenosa; imi pequeno 

 numero por via intraperitoneal e sub- 

 cutânea. 



Em um grupo, os animaes foram ino- 

 culados em um mesmo dia, com uma 

 mesma emulsão de uma mesma cultura 

 de 24 horas de B. paratyphico A. 



A emulsão foi assim feita: 



Emulsão A. — Preparamos 10 tubos 

 de ensaio, cada lun contendo 2 cc. de 



agua physioogica: en cada tubo enulslo- 

 nainos uma alça calibrada de 0.UÜ2 grs. 

 de uma cuítura de 24 horas de B. Para- 

 Lyphico A; o conteúdo dos 10 tubos foi 

 reunido em 1 balão e esíe collocado no 

 banho-Maria a 60o durante 1 hora; agi- 

 tada a mistura, foi distribuida na pro- 

 porção de 2 cc. para cada tubo de en- 

 saio; foram inoculados na veia margi- 

 nal da orelha na mesma occasião, 10 

 coelhos, cada um délies com o conteúdo 

 de um tubo. 



Em um outro grupo mais numeroso, 

 inoculamos isoladamente cada coelho do 

 peso de 950—1500 grs. por via endove- 

 nosa, subcutânea e intraperitoneal com 

 uma emulsão em agua physiologica de 

 uma cultura em agar de 2t horas, de B. 

 Paratyphico A (1 alça de 0,002 grs.-f 

 2 c. c. de agua physiologica, morta pelo 

 aquecimento durante 1 hora no banho- 

 Maria a G5o). 



A contagem dos glóbulos brancos foi 

 feita no liemalimelro com camará de 

 LEVY ( Ame!Í:a:i Standard Haemacyto- 

 meler With LEVY Coimting Chamber). 



Fizemos habitualmente nesse appa- 

 relho, 4 contagens simultaneas dos gló- 

 bulos brancos, occasionalmente 3 ou 2, 

 aproveitando as médias das determina- 

 ções. 



A cifra normal de glóbulos brancos 

 no coelho é avaliada em 5-14.000 

 (GRUBER), cerca de 9.000 (HEINEKE), 

 9-12.(;0l) (PROSCllER), 8-13.000 (TAL- 

 LQVIST). Receatemente PENTIMALLI, 

 examinando 10 coelhos normaes, ve- 

 rificou varia. ões individuaes do numero 

 de glóbulos bra ¿cos indo de 4.520 a 10.300 

 por mm.3 razão pela qual acha que deve 

 haver muita prudencia no attribuir uma 

 signiricação a oscillações leves; o nume- 

 i-o 6.876 representa a média das suas de- 

 terminações. 



As nossas pesquizas, que foram con- 

 troladas pelo e^ame histológico da me- 

 dulla óssea, deram o seguinte resultado: 



