Zur Technik der mikroskopischen Knochen-Untersuchung. 483 
centsatzes für starke Knochen hat keinen Vortheil, denn was man 
an Procenten der Säure vermindert, muss man an Zeit zulegen 
und ich habe die Erfahrung gemacht, dass 5 Tage in 10%, Säure 
die Knochen weniger angreift, als 14—16 Tage in 5°/o. 
Die Art der Anwendung war folgende: Die frischen Knochen 
wurden entweder als ganze oder durch Sägesehnitte in 6— 8 Quer- 
stücke zerlegt auf 3 Tage in 95 °/, Alcohol gebracht. Aus dem 
Aleohol kamen sie in die 10°/, Salpetersäure und blieben bei täg- 
liehem Wechsel der Flüssigkeit S—-10 Tage in derselben. Ob die 
Entkaikung vollendet ist, erkennt man am besten durch Einstechen 
einer feinen Nadel in den Knochen.. Man muss nun darauf achten, 
dass man den Knochen nicht über seine Entkalkung hinaus in 
der Säure lässt. Bis zur vollendeten Entkalkung bleiben die 
Knochen in der Salpetersäure rein weiss, einige Zeit darauf aber 
nehmen sie eine schwefelgelbe Farbe an, die besonders dadurch 
störend wirkt, dass sie die spätere Tinktion der Schnitte beein- 
trächtigt. Nach dem Herausnehmen aus der Säure werden die 
Knochen. womöglich durch fliessendes Wasser 1—2 Stunden aus- 
gewaschen und dann wieder in 95°/, Aleokol gelegt. Nach einigen 
Tagen wird der erste Alcohol, der meist noch ziemlich stark 
säurehaltig ist, abgegossen, die Knochenstücke auf Fliesspapier 
leicht abgetrocknet und dann in neuen Alcohol gelegt, in dem sie 
dann dauernd bleiben. 
Jugendliche und foetale Knochen legte ich meist zuerst in 
Lösungen, die gleichzeitig 1°, chromsaures Kali und !/ıo %/o Chrom- 
säure enthielten, alsdann entkalkte ich sie mit Salpetersäure von 
1— 2°, der ich häufig geringe Mengen von Chromsäure (!/ıo°/o) 
oder ehromsaures Kali (1°/,) zusetzte. Legt man derartige Knochen 
nach vollendeter Entkalkung in Alcohol, so nehmen sie die be- 
kannte reine hellgrüne Farbe an, welche eine vorzügliche Grund- 
farbe sowohl für die Haematoxylin-, als ganz besonders für die 
Eosin-Färbung bildet. 
Nachdem ich die Vorzüge der Salpetersäure kennen gelernt 
hatte, habe ich die anderen anorganischen Säuren gar nicht mehr 
benutzt. 
Auch von den organischen Säuren bin ich nach einigen Ver- 
suchen wieder abgegangen. Die Essigsäure, die Milchsäure und 
der Holzessig haben alle drei eine ziemlich bedeutende entkalkende 
Kraft, aber sie lassen die Gewebe stark quellen und wenn man 
