10 Peter Thomsen, Über das Vorkommen von Nitrobakterien im Meere. 10 



Mit steriler Piatinöse entnahm man der flüssigen Nährlösung ein Tröpfchen und breitete es auf 

 der glatten Oberfläche der Platte in parallelen Strichen aus. Die Platte hatte etwa 1 cm Dicke und war 

 vorher in der Petri-Schale 15 Minuten bei 120° sterilisiert. Die Nährlösung reichte etwa bis zur halben 

 Höhe, wie dies Winogradsky vorschreibt. Wenn die Petri-Schalen im Wärmeschrank standen, so trat 

 schon nach 3—4 Tagen kräftige Nitritreaktion auf. Nach 8 — 10 Tagen konnte man mit bloßem Auge 

 auf den reagierenden Platten gelbe Flecke erkennen, die bei genauerer Betrachtung mit dem Präparier- 

 mikroskop sich auf den Impfstrichen zeigten. Mit der Platinnadel wurde einer dieser Flecke abgehoben 

 und mit Jodjodkalium behandelt. Er erwies sich unter dem Mikroskop als ein einheitlicher Haufen von 

 rundlich-ovalen Zellen. 



In anderen Präparaten zeigten sich diese Organismen vielfach wurstförmig verlängert oder bisquitförmig 

 eingeschnürt. 



Beimpfte man die Magnesiagipsplatten direkt mit einer kleinen Kolonie, indem ein gelbes Fleckchen 

 mit d'er Platinnadel auf einer sterilen Platte ausgestrichen wurde, so traten die Impfstriche schon nach 

 4 — 5 Tagen auf, und die in der Petri-Schale befindliche Nährlösung gab nach 2 — 3 Tagen eine starke 

 Nitritreaktion. Von einer solchen Platte wurde eine größere Anzahl steriler Kolben beimpft, die dann 

 ständig der mikroskopischen Untersuchung unterworfen wurden. Auf diese Weise gelang es, in einigen 

 Kolben den Nitritbildner rein zu erhalten, dessen Morphologie jetzt geschildert werden soll. 



Wird eine ammoniakhaltige Nährlösung beobachtet, die mit einer gut nitrifizierenden Kultur beimpft 

 worden ist, so bemerkt man zunächst äußerlich nichts. Die Flüssigkeit bleibt vollkommen klar. Nach 

 4—5 Tagen zeigt die Nährlösung die erste starke Nitritreaktion. Entnimmt man jetzt der oberen Flüssigkeits- 

 schicht einen Tropfen, so ergibt sich bei mikroskopischer Untersuchung, daß er keine Bakterien enthält. 

 Außer ganz unbedeutenden anorganischen Verunreinigungen ist in ihm bei Jodjodkaliumfärbung überhaupt 

 nichts zu erkennen. Dagegen zeigt ein aus dem Bodensatze stammendes Präparat ein ganz anderes Bild. 

 Selten sind isolierte Zellen zu beobachten; häufiger zeigen sich jedoch kleine, festumrandete Zooglöen, die 

 schätzungsweise 8 — 32 Kokken enthalten und maulbeerförmige Gestalt haben, bei der die Kokken die 

 kleinen Teilbeerchen bilden. Zu dieser Zeit gibt die Kultur noch eine starke Ammonikreaktion. Untersucht 

 man nach einigen Tagen den Bodensatz, so ist eine Vermehrung und Vergrößerung der Zooglöen wahr- 

 zunehmen. Nach 8 — 12 Tagen verbreitet sich eine Trübung in der ganzen Flüssigkeit; doch bleibt sie 

 sehr schwach, so daß sie erst bei aufmerksamer Betrachtung sichtbar wird. Die Reaktion auf Ammoniak 

 nach Neßler gibt zu dieser Zeit nur noch schwache Gelbfärbung. Eine Untersuchnng der Magnesiaschicht 

 zeigt, daß sich die Bakterien im ganzen Bodensatz verteilt vorfinden. Die eigenartige Wachstumsform der 

 Kokken in Zooglöen ist nicht mehr anzutreffen. Anstatt der scharf umgrenzten, runden Zooglöen, deren 

 Zellen ohne Zwischenraum aneinander stießen, kommen jetzt zahlreiche einzelne Zellchen zwischen den 

 Magnesiasplitterchen vor. Magnesiateilchen scheinen das Substrat zu sein, auf dem diese Organismen leben. 

 Die Bakterien sind nicht alle von gleicher Gestalt, sondern bald sind sie oval gestreckt, bald fast kugelig. 

 Häufig sind auch bisquitartige Teilungsformen mit einer Einschnürung in der Mitte. Vereinzelte größere 

 Ansammlungen im Bodensatz scheinen Zooglöen zu sein, die in Auflösung begriffen sind ; denn am unregelmäßig 

 umgrenzten Rande liegen die Zellen in losem Znsammenhang, während die Mitte der Ansammlung noch 

 ein zooglöenartig dichtes Gefüge hat. In der oberen Flüssigkeitsschicht finden sich jetzt zahlreiche Einzel- 

 mikroben, zuweilen bemerkt man darin auch lockere Häufchen von Bakterien. 



Zahlreiche Beobachtungen im hängenden Tropfen ließen auch in diesem Stadium keine Eigenbewegung 

 der Kokken erkennen. Nur einmal konnte in einer Ostseeschlickreinkultur, die vor 10 Tagen angesetzt 

 war, ein Schwärmen der Einzelzellen bemerkt werden. Deutlich sah man, wie sich einzelne Bakterien und 

 auch längere Körper, die bisquitförmige Gastalt hatten, durch das Gesichtsfeld des Mikroskops bewegten. 

 Bei den Organismen anderer Herkunft [Gartenerde, Helgoland, Golf von Neapel] ist es mir nicht gelungen, 

 Beweglichkeit festzustellen, trotzdem Einzelbakterien zahlreich im hängenden Tropfen vorhanden waren. 



Verstärkt man die Kultur fortwährend durch einige Tropfen einer 10-prozentigen Lösung von 

 Ammoniumsulfat, so kann die schwache Trübung der Nährflüssigkeit andauern und bei mikroskopischer 

 Untersuchung finden sich darin stets zahlreiche Einzelbakterien und Teilungsformen. Wird das Ammonium- 

 sulfat vollständig verbraucht, so tritt nach 3^4 Tagen eine Klärung der Flüssigkeit ein. Dann findet 



