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contatto, il glucoside subisce l'idrolisi e di conseguenza l'acido 

 cianidrico si libera. Questa è la reazione che bisogna impedire 

 quando si faccia la ricerca in parola ed in ciò consiste la diffi- 

 coltà sperimentale perchè, durante le manipolazioni, la scissione 

 enzimatica può avvenire con grande rapidità. I metodi seguiti, 

 sono perciò basati sulla proprietà degli enzimi di venire distrutti, in 

 ambiente umido, alla temperatura di 100". A tal fine Treub (^) versa 

 sui tessuti in esame dell'acqua bollente, procede immediatamente 

 alla distillazione della massa in corrente di vapore acqueo e nel 

 liquido distillato ricerca l'acido cianidrico considerando il prin- 

 cipio distillato come preesistente nel vegetale allo stato libero. 



Il metodo usato da Treub si è riconosciuto non rigoroso, 

 perchè infatti gli enzimi non assumono istantaneamente la tem- 

 peratura dell'acqua bollente, la quale, provocando invece la rot- 

 tura delle cellule permette ad essi di mettersi a contatto coi 

 glucosidi determinandone così la scissione idrolitica ed il relativo 

 sviluppo di acido prussico. 



L' imperfezione del metodo di Treub fu rilevata da Gui- 

 GNARD (*) che consigliò, come mezzo migliore per distruggere 

 istantaneamente gli enzimi, la sostituzione dell' alcool bollente 

 all'acqua; Treub stesso modificò in seguito il suo metodo 

 usando delle soluzioni di cloruro di sodio bollenti a 106° (') 

 oppure introducendo i tessuti in esame nel liquido bollente an- 

 ziché versare il liquido sui tessuti {*). 



Anche coi sistemi così modificati si trova sempre, nei di- 

 stillati, sebbene in quantità minore, dell'acido cianidrico che si 

 supponeva preesistente; tuttavia rimaneva ancora il dubbio che, 

 perfezionando ulteriormente il metodo, si potesse giungere a 

 risultati più attendibili. Siccome condizione necessaria per distrug- 

 gere l'enzima nel più breve tempo è che la temperatura del 

 liquido non si abbassi al momento dell' immersione dei pezzi, 

 noi f), a questo scopo, sperimentando sulle foglie di varie piante 



(1) Annales da J ardiri botaniqiie de Buitenzorg (2" serie) IV, 91, 1904. 



(*) Comptes rendus de l' Academie des Sciences, CXLI, 16, 1905. 



(') Annales du Jardin botaniqiie de Buitenzorg (2* serie), VI, 93, 1907. 



(*) Annales du Jardin botanique de Buitenzorg (2* serie), Vili, 114, 1909. 



(^) Ravenna e Tonegutti - Rendiconti della R. Accademia dei Lincei, XIX, 2, 19, 1910. — 

 Ravenna e Babini - ibid., XXI, 1, 540, 1912. — Ravenna e Bosinelli - ibid., XXI, 2, 355, 

 1912. 



