72 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA 



Algunos autores, para ahorrarse las manipulaciones de esa inclusión, 

 recomiendan practicar los cortes por congelación con el CO» , sin fijación 

 previa en ningún líquido, pasándolos en seguida al alcohol de 96^*, pro- 

 cedimiento defectuoso porque los cortes, al deshidratarse enérgicamente, 

 se arrugan en tales términos que las preparaciones obtenidas son muy 

 defectuosas. 



Una vez practicados los cortes se procede á su coloración, para lo cual 

 se utiliza de preferencia uno de estos dos métodos : 



I.** Método de Brault. — Los cortes recién obtenidos se extienden cui- 

 dosamente sobre el porta-objetos, colocando sobre ellos unas cuantas 

 gotas de la solución siguiente : 



Yodo 1 gramo. 



Yoduro potásico 10 gramos. 



Agua destilada 30 — 



Goma de consistencia siruposa 200 — 



Disuélvase. 



que se dejan secar, y á las veinticuatro horas se deposita una nueva 

 gota de la solución y se cubre con la laminilla. El glucógeno aparece te- 

 ñido de rojo parduzco, en forma de bloques incluidos en las células, no 

 siendo muy bellas las preparaciones por no resultar bien diferenciadas 

 aquéllas, por lo cual considero preferibles los métodos de coloración pro- 

 piamente dichos, como es el siguiente: 



2.° Método de P. Best. — Como el glucógeno es muy soluble en el 

 agua, hay que manejar con mucho cuidado los cortes no sumergiéndolos 

 en agua sola, y precisamente el método de que voy á ocuparme tiene en 

 cuenta este inconveniente, consiguiendo preparaciones muy bellas é ins- 

 tructivas. 



Una vez obtenidos los cortes finos, se colorean primero con hematoxi- 

 lina de Bbehmer ó hemateína de Mayer, durante cinco ó diez minutos, y 

 después con una mezcla de 2 partes de solución amonico-litínica de car- 

 mín (1), 3 partes de licor amoniacal cáustico y 6 partes de alcohol metí- 

 lico absoluto, de cuya mezcla á las dos horas se trasladan para su deco- 

 loración, durante varios minutos, á otra compuesta de 



2 partes de alcohol metílico absoluto, 

 5 id. de alcohol etílico absoluto 

 y 5 id. de agua destilada. 



Con el empleo de uno y otro método pueden suceder dos cosas: ó que 

 no se descubra glicógeno en las células hepáticas, en cuyo caso afirma- 



(1) La solución de carmín tiene la fórmula siguiente; carmín, 1 gramo; cloruro 

 amónico, 2 gramos, y carbonato de litio, 0'50 gramos. Hágase hervir en 50 gra« 

 mos de H»0 dpstilada y añádase 20 cent. cúb. de amoníaco. 



