106 BOLETÍN DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE BIOLOGÍA 



que deje de salir color rojo ; lavar, y coloración simple con azul de meti- 

 leno fenicado. 



Aconsejamos la decoloración con la mezcla de alcohol absoluto y ace- 

 tona á partes iguales, pues de este modo es más rápida y perfecta. 



Procedimiento Ziehl B. — Las preparaciones fijadas por el calor se tiñen 

 en caliente con la fuchina de Ziehl, hasta la emisión de vapores durante 

 ti-es minutos ; lavar para arrastrar el exceso de color ; tratar con el ácido 

 nítrico diluido al tercio hasta decoloración completa; lavar; tratar con 

 el líquido de Lugol durante cinco minutos ; lavar ; descolorar con alcohol 

 absoluto, ó con la mezcla de alcohol-acetona á partes iguales (de prefe- 

 rencia esta última) ; lavar y coloración simple con azul de metileno fe- 

 nicado. 



VIII. Procedimiento de M'óller para la coloración de esporas, y modi- 

 ficación de V. Gavina. — Las preparaciones fijadas por el calor se tratan 

 con cloroformo durante dos minutos; lavar; tratar durante dos minutos 

 con solución acuosa de ácido crómico al 5 por 100; lavar; teñir con la fu- 

 china de Ziehl en caliente hasta emisión de vapores, durante dos minu- 

 tos; decolorar durante cinco ó siete segundos con ácido sulfúrico diluido 

 al 5 por 100; lavar; coloración simple con azul de metileno fenicado. 



La modificación de V. Gavina consiste en sustituir la decoloración por 

 el ácido sulfúrico por los siguientes tiempos: decolorar con alcohol abso- 

 luto hasta que deje de salir color rojo de la preparación ; lavar; decolorar 

 durante un minuto con la disolución acuosa de sulfito sódico al 1 por 100. 



IX, Procedimiento Ziehl C y D. — Son muy semejantes al Ziehl A y B, 

 pues sólo difieren en que la decoloración por el ácido nítrico se sustituye 

 por la obtenida con el sulfito sódico al 1 por 100 de agua, actuando du- 

 rante uno ó dos minutos. , 



Procedimiento Ziehl C. — Tefiir en caliente hasta emisión de vapores, 

 y durante tres minutos, con la fuchina de Ziehl; lavar ligeramente para 

 arrastrar el exceso de color ; tratar con el líquido de Lugol durante cinco 

 minutos ; lavar ; decolorar con la mezcla de alcohol y acetona hasta que 

 deje de salir color rojo; lavar; decolorar durante uno ó dos minutos con 

 la disolución del sulfito sódico al 1 por 100 de agua; lavar; coloración 

 simple con azul de metileno. 



Procedimiento Ziehl D. — Teñir en caliente hasta emisión de vapores, 

 con fuchina de Ziehl, durante tres minutos; lavar ligeramente para arras- 

 trar el exceso de color; decolorar con la mezcla de alcohol y acetona 

 hasta que deje de salir color rojo ; tratar con el líquido de Lugol durante 

 cinco minutos; lavar; decolorar, durante uno á dos minutos, con la di- 

 solución de sulfito sódico al 1 por 100 ; lavar ; coloración simple con azul 

 de metileno. 



