101 



treíanto, consegue matar ratos, em 24 horas, 

 com 0,05 ce. de filtrado de cultura de quatro 

 semanas e em 48 horas, com 0,005 cc. de cul- 

 tura de 48 horas. Aquecido a 70 gráos, per- 

 de o filtrado a toxídez para camondongo, man- 

 íendo-a para rato, cobaia e coelho. A produ- 

 ção de antitoxina em animais inoculados com 

 toxina aquecida fez o autor acreditar na exis- 

 tencia de 2 toxinas no filtrado. 



Em outro ensaio, inoculámos em rato de 

 peso aproximado de 100 gr. filtrado em ve- 

 la CHAMBERLAND de culturas de um mez, 

 em melo preparado, adicionando a 500 cc. 

 de caldo neutro ou alcalino 150 de soro de 

 cavalo, aquecido a 56 gráos, mantendo um dos 

 balões de FERNBACH no armario do labo- 

 ratorio e outro em estufa a 37 gráos. Dos ratos 

 inoculados, morreu um em 2 dias com forte 

 edema hemorajico no ponto de inoculação. 



A ausencia de germes no edema fez-nos 

 pensar em ação especifica do filtrado, hipo- 

 tese esta afastada após inoculaç?.o de doses 

 decrecentes, desde 2cc. até 0,1 cc. do mesmo 

 material em nova serie de ratos, que se man- 

 tiveram todos vivos. 



De posse destes resultados, semeiámos 

 outros balões de FERNBACH, contendo cal- 

 do neutro e quantidades variáveis de carbo- 

 nato de sodio cristalisado, 1-2-3-4 grs. por 

 litro. O conteúdo de cada um destes balões 

 filtrado após vinte dias, um mez ou quaren- 

 ta dias de permanencia em temperatura am- 

 biente e inoculado cerca de 1 cc. em ratos 

 de 100 grs de peso, por via subcutânea, mos- 

 trou-nos que, ainda desta vez, não tínhamos 

 conseguido toxina pestosa livre no caldo. 



Em outra serie, adicionámos ao caldo neu- 

 tro doses crecentes de sulfato de sodio, des- 

 de 1 até 10 grs. por litro, mantendo os balões 

 em temperatura ambiente e na estufa a 37 

 gráos. Ainda desta vez, as inoculações em ra- 

 tos foram por via subcutânea. Dos inoculados 

 com o filtrado de cultura, contendo 6 a 8 grs 

 por litro, morreram alguns, 3 a 5 dias depois, 

 sem que da necropse se pudesse tirar conclu- 

 são. Repetidas inoculações com doses decre- 

 centes deste material provaram-nos não exís- 



von Kerzen blieben die Tiere nicht nur am 

 Leben, sondern zeigten auch gegen eine 

 spaetere Impfung mit lebenden Bazillen keine 

 Immunitaet. Dagegen konnte MARKL [1898] 

 Ratten binnen 24 Stunden mit 0,05 Kzm. und 

 binnen 48 Stunden mit 0,005 Kzm. Filtrat 

 einer vier Wochen alten Kultur toeten. Auf 

 70o erhitzt verlor das Filtrat die Giftigkeit 

 fuer Maeuse, vvaehrend eine solche fuer 

 Ratten, Meerschweinchen und Kaninchen fort- 

 bestand. Die Bildung von Antitoxin bei den 

 mit Toxin geimpften Tieren Hess den Autor 

 die Existenz zweier Toxine im Filtrat an- 

 nehmen. 



Bei einem anderen Versuche impfte ich 

 eine za. 100 Gramm schwere Ratte mit durch 

 CHAMBERLANDsche Kerzen filtrierten, 

 einen Monat alten Kulturen; das Naehrme- 

 dium bestand aus 500 Kzm. neutraler oder 

 leicht alkalischer Bouillon mit 150 Pferdese- 

 rum, wobei ein Ballon im Laboratoriumssch- 

 ranke, ein anderer bei 37» auíbewahrt wurde. 

 Von den geimpften Ratten starb eine nach 

 zvvei Tagen mit starkem haemorrhagischem 

 Oedem der Impfstelle. 



Das Fehlen von Keimen an der Impfstel- 

 le liess mich an eine spezifische Wirkung des 

 Filtrates glauben ; indessen wurde diese 

 Annahme durch eine neue Versuchsreihe v*;i- 

 derlegt, bei welcher absteigende Dosen von 

 2,0-0,1 Kzm. auf Ratten uebertragen wurden, 

 welche alie am Leben blieben. 



Im Besitze dieser Resultate impfte ich 

 neue Ballons, welche neutrale Bouillon mit 

 wechselnden Mengen krystallisierten Natrium- 

 karbonatcs (1,2,3 und 4 Gramm pro Liter) 

 enthielten. Nach einem Wachstum von 20,30 

 oder 40 Tagen bei Zimmertemperatur wurde 

 der Inhalt dieser Ballons filtriert; eine subku- 

 tane Verimpfung von je 1 Kzm. auf Ratten 

 von 100 Gramm Gewicht, zeigte mir dass 

 auch dieses Mai die Bouillon kein freies To- 

 xin enthielt. 



lei einer weiteren Serie setzte ich zu der 

 neutralen Bouillon steigende Dosen von Na- 

 triumsulfat (1,0- 10,0 gr. pro Liter) und liess die 

 Ballons bei Zimmertemperatur und im Bruet- 

 schrank bei 37° stehen. Auch diesmal war 

 die Verimpfung subkutan. Von den Tieren, 



