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De culturas de 48 horas em agar emul- 

 sionadas em solução fisíolojica e mortas pe- 

 lo calor, clorofórmio ou toluol, procurámos 

 obter uma substancia toxica, que se liber- 

 tasse do bacilo e, inoculando os germes 

 mortos em ratos e cobaias verificámos que 

 a inoculação de germes aquecidos a 65 gráos, 

 durante uma hora não é mortal, concordan- 

 do este resultado com o da comissão alemã 

 pare .estudo da peste. Cerca de 30 o/o dos 

 ratos inoculados com bacilos mortos pelo 

 clorofórmio morriam 4 a 5 dias depois. 



A técnica de LUSTIG e GALLEOTI, re- 

 petida, permitiu-nos obter um produto to- 

 xico, que, embora mortal para ratos de 100 

 grs. de peso, quando inoculado com 1, 3 

 -1, 5e 2mgs., não o era para todos os ratos 

 inoculados e imunizava cerca de 40 o/o deles, 

 quando inoculados com dose submortal, como 

 seja 0,8mgs. 



Nos ensaios para extração da nucleo- 

 proteina de ROWLAND [1912] preferimos 

 destruir pelo clorofórmio os germes que 

 contrario ao que escreve este autor, assim 

 nos forneceram produto de toxidez mais ele- 

 vada que o extraído do bacilo peio calor, 

 porque a temperatura necessária de 60 gráos 

 diminuía o poder toxico da nucleopro- 

 teina. MARKL [1898] já tinha verificado que 

 bacilo da peste morto pelo clorofórmio tem 

 poder toxico mais elevado do que, quando 

 morto pelo calor. 



O clorofórmio dá logar á formação de 

 um produto atóxico instave' e reversível, que 

 de novo adquire a toxidez, quando tratado 

 pelo sulfato de sodio. A ação toxica da nu- 

 cleoproteina assim obtida diminue rapida- 

 mente. Procurámos evitar este incoveniente 

 secando o produto, sem que assim obtivés- 

 semos resultado mais favorável. Notámos 

 ainda que a toxidez da nucleoproteina se 

 prende á virulencia do germe, assim é, que 

 durante o correr do trabalho e por motivo 



einer Temperatur von 37 herstellt, ín einem 

 Gefaesse mit Eis rasch erstarren laesst und 

 stueckweise in Glaesern mit Glasstoepseln 

 aufbewahrt. Zum Gebrauche wird ein Stueck 

 in 0,85 o/o Salzloesung bei 36° aufgeloest, 

 auf Oo abgekuehlt und dann filtriert. 



Eíne halbstuendige Erhitzung auf 55 oder 

 60o reduziert die Giftigkeit auf 1/4, resp. 1/9. 



Aus 48stuendigen, in physiologischer 

 Loesung suspendierten und durch Hitze, 

 Chloroform oder Toluol abgetoeteten Kultu- 

 ren, versuchte ich elne toxische. Substanz zu 

 gew^innen, welche aus den Bazillen ausgezo- 

 gen koennte ; bei Verimpfung der toten Kei- 

 me auf Ratten und Meerschweinchen, kon- 

 statierte ich, dass auf 65o erhitzte Bazillen 

 nicht toetlich v^^irken, was mit den Resulta- 

 ten der deutschen Kommission zum Studium 

 der Pest uebereinstimmt. Von den Ratten, 

 denen mit Chloroform abgetoetete Bazillen 

 einverleibt wurden, starben 30 o/o 4-5 Tage 

 darauf. 



Durch Wiederholung der Technik von 

 LUSTIG und GALEOTTI gelang es mir ein 

 toxisches Produkt zu erhalten, welches in 

 Dosen von 1, 0-1, 5 oder 2 Mgr. fuer Rat- 

 ten von 100 Gramm Gewicht zwar toedlich 

 war, aber nicht immer, waehrend es in sub- 

 mortaler Dose (z. B. 0,8 iV\gr.) verimpft, 

 40 o/o dersellen immunisierte. 



Bei den Versuchen, das Nukleoprotein 

 von ROWLAND zu isolieren, zog ich es vor, 

 die Keime durch Chloroform zu toeten, da 

 sie mir so-im Gegensatz zu den Angaben 

 des Autors-ein giftigeres Produkt lieferten, 

 als die durch Hitze abgetoeteten Bazillen, 

 weil die noetige Temperatur (60o) die Toxi- 

 zitaet des Nukleoproteins herabsetzte. MARKL 

 stellte schon 1898 fest, dass durch Chloroform 

 getoetete Bazillen hoehere Giftigkeit besitzen, 

 als durch Hitze abgetoetete. 



Das Chioroforrn fuehrt zur Bildung 

 eines atoxischen und reversibein Produktes, 

 welches bei Behandlung mit Natriumsulfat 

 wieder giftig wird. Die Wirksamkcit des so 

 erhaltenen Nukleoprotein mimmt rasch ab ; 

 ein Versuch diesem Uebelstande durch 

 Trockncn abzuhelfen, ergab mir kein besse- 

 res Résultat. Ich beobachtete auch, dass die 

 Giftigkeit des Nukleoproteins von der Viru- 

 lenz der Keime abhaengt; so ergab sich, als 

 der Stamra, mit dem ich gevvoehnlich arbei- 

 tete, waehrend dieser Studien (aus Gruenden, 



