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Em todo caso a ação do calor apressa a ho- 

 niojeneização. Os d<iu3 reajentes podem ser 

 empregados em um único tempo. Pode-se 

 juntar alcool caso exista alguma espuma, ou 

 mesmo como garantia do abaixamento da 

 densidade do liquido, o que evita a necessi- 

 dade de verificar a densidade antes da cen- 

 trifugação. 



Centrifugar durante 15 minutos a 1200 

 voltas. 



A verificação bateriolojica dos sedimen- 

 tos obtidos de escarros tuberculosos, após 

 homojeneização por esse método, feita porém 

 a frio, sem permanencia do material na estufa, 

 mostrou sempre que os bacilos da tubercu- 

 lose achavam-se mortos, pois os animais in- 

 jetados com esses sedimentos não se infeía- 

 vam, o que obriga para a verificação dos 

 casos negativos a inoculação de animais com 

 o material em natureza. Dai decorre não 

 haver inconveniente no uso do calor para fa- 

 cilitar a homojeneização. 



O exame microscopio do sedimento mos- 

 trava a integridade morfolojica das células 

 bacterianas (microbios de associação e baci- 

 los da tuberculose) que conservavam suas 

 afinidades corantes. 



Esses sedimentos inoculados em cobaias 

 não determinaram formação de abcesso, nem 

 de cancro ou tampouco reação ganglionar 

 aparente, (os animais não se tuberculizaram 

 no prazo de 6 mezes). 



Para o exame microscópico o sedimento 

 obtido pela centrifugação do material deve 

 ser espalhado em laminas, na relação de 1 

 ou 2 laminas para cada cc. do material em 

 natureza, empregado para a homojeneização, 

 ou 10 cc. do material (lomojeneizado. 



Sobre essas laminas deve-se proceder a 

 contajeni. 



A contajem dos bacilos assim feita refe- 

 rirá o numero medio de bacilos por campo 

 de observação do sedimento correspondente 

 a 1 cc ou gr. do escarro. 



Manguinhos, Julho- 1914. 



du liquide avant la centrifugation. 



Centrifuger pendant 15 minutes à 1.200 

 tours. 



La verification bactériologique des sédi- 

 ments obtenus de crachats de tuberculeux, 

 après l'homogénéisation par cette méthode, 

 mais faite à froid et sans la permanence du 

 matériel dans l'étnve, a toujours démontré 

 que les bacilles de la tuberculose étaient 

 morts. En effet, les animaux auxquels on in- 

 jectait ces sédiments n'étaient pas infection- 

 nés, ce qui nous obligeait pour vérifier les 

 cas négatifs, à inoculer des animaux avec le 

 matériel à l'état naturel. D'où il s'ensuit qu'il 

 n'y a d'inconvénient à employer la chaleur 

 pour faciliter l'homogénéisation. L'examen 

 microscopique du sédiment révélait l'intégri- 

 té morphologique des cellules bactériennes 

 (microbes d'association et bacilles de la tu- 

 berculose) qui gardaient leurs affinités colo- 

 rantes. 



Ces sédiments, inoculés à des cobayes 

 n'ont pas déterminé la formation d'abcès, ni 

 de chancre ni même de une reaction gangli- 

 onaire apparente (les animaux, au bout de 

 six mois, ne présentaient aucun symptôme 

 de tuberculose). 



Pour l'examen microscopique le sédiment 

 obtenu par la centrifugation du matériel 

 doit être répandu sur des lamelles (1 ou 2 

 lamelles par cc. du matériel en éiii natu- 

 rel) employés pour l'homogénéisation, ou 

 10 cc. de la matière homogénéisée. 



Sur ces lamelles on doit calculer le nom- 

 bre de bacilles par champ d'observation du 

 sédiment correspondant á 1 cc. ou gr. de 

 crachat. 



iVlanguinhos, juillet -1914. 



