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cultiver le microbe décrit par Nicolaier et à reproduire le tétanos 

 chez les animaux d'expériences auxquels il inoculait des cultures 

 pures de ce microbe. 



La chose n'a pas été aisée toutefois. Le pus qui servit de point 

 de départ à ces expériences et qui provenait de la blessure d'un 

 soldat mort du tétanos à l'hôpital, contenait bien les bacilles à 

 tête d'épingle de Nicolaier, mais inoculé sur du sérum il donna, 

 comme l'avaient remarqué d'autres expérimentateurs, naissance h 

 des cultures impures, quoique actives, desquelles M. Kilasalo, tant 

 qu'il se servit des moyens usuels de séparation, put isoler les micro- 

 organismes les plus divers, 3 espèces anaérobies, 5 espèces facul- 

 tativement anaérobies et 7 espèces aérobies, dont aucun cependant, 

 inoculé à l'état de pureté, ne donna le tétanos. Ayant remaripié 

 que les cultures les plus riches en bacilles à tète d'épingle étaient 

 celles qui avaient été tenues 48 heures à 36-38°, M. Kitasato 

 les soumit, au bain -marie, à la température de 80" pendant 

 3/4 d'heure à i heure. Ces cultures donnèrent encore le tétanos, ce 

 qui prouve que les spores avaient résisté à cette température. 

 Ensemencées dans de la gélatine dont il fit des plaques à l'abri de 

 l'air et en présence de l'hydrogène, les cultures ainsi traitées don- 

 nèrent alors naissance au bout de 8 jours (à 18-20"^ à des colo- 

 nies composées uniquement de bacilles un peu plus petits que 

 ceux de l'œdème malin, et qui semés sur de l'agar ou dans du 

 bouillon tenu à l'abri de l'air, donnèrent des cultures sporifèresavec 

 des bacilles en tète d'épingle. Ces cultures pures inoculées aux 

 animaux, leur donnèrent régulièrement le tétanos. Les autres 

 bacilles anaérobies contenus dans le pus étudié par M. Kitasato 

 forment aussi des spores, mais moins résistantes que celles du 

 bacille tétanique, car le chaulFage à 80" les détruit déjà au bojt 

 de 30 minutes. Dans tous les cas où M. Kitasato produisit, dans la 

 suite, le tétanos expérimental par l'inoculation de terre de jardin, 

 il lui fut possible d'isoler le bacille tétanique par cet artifice de cul- 

 ture. 11 faut cependant se garder d'employer une température plus 

 élevée, car à 100° les spores sont tuées en 5 minutes. 



Les bacilles du tétanos sont absolument anaérobies et ne croissent 

 qu'en l'absence d'oxygène. L'hydrogène leur convient, mais ils ne 

 supportent pas l'acide carbonique. Ils croissent bien dans la gélose 

 et dans la gélatine, surtout lorsqu'on ajoute 1.5 à 2 p. 100 de sucre, 

 de même que dans le bouillon peptonisé. La gélatine est liquéfiée, 

 avec formation de gaz. Les cultures dégagent une odeur caractéris- 

 tique de brûlé. Des cultures successives n'affaiblissent pas la virulence 

 du microbe. Les colonies dans la gélatine ressemblent un peu à 

 ceWes du Bacillus siifjtilis, mais elles liquéfient la gélatine beaucoup 

 moins rapidement. Du centre de la colonie partent de nombreuses 

 ramifications, qui donnent aux vieilles cultures l'apparence d'une 

 colonie de moisissure. Dans les cultures par piqûre, les bacilles se 



