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blastomycètes commençaient à se développer. Quand de 

 nombreuses levures se voyaient dans une goutte pendante 

 du liquide, on faisait des plaques après avoir préparé des 

 dilutions dans du bouillon et bien agité celui-ci pour obte- 

 nir une répartition égale des germes dans le liquide et 

 bien les séparer les uns des autres. Des quantités variables 

 de ces dilutions étaient ensemencées dans de la gélatine 

 neutre et dans de la gélatine acide, que l'on coulait en 

 plaques dans des boîtes de Pétri. Les colonies, une fois 

 développées, étaient examinées au microscope. Plusieurs 

 gouttes de la gélatine ensemencée et coulée en plaques 

 étaient aussi placées sur des porte-objets concaves, que 

 l'on tenait à la même température que les plaques, et qui 

 servaient principalement à suivre sous le microscope le 

 mode de multiplication des blastomycètes et la formation 

 des colonies. Après avoir bien observé au microscope les 

 caractères des colonies auxquelles les cellules isolées 

 avaient donné naissance, on pouvait mieux juger si les 

 colonies qui s'étaient développées sur les plaques de géla- 

 tine étaient dues à la multiplication d'une seule cellule. ou 

 de deux cellules différentes. On sait, en effet, que Holm (1), 

 dans 23 séries d'expériences, eut une seule fois des cul- 

 tures pures, c'est-à-dire 100 colonies produites par 

 100 cellules, fait qui ne se présenta pas dans les autres 

 séries. L'erreur maximale se produisit dans une série 

 dans laquelle 135 cellules avaient donné naissance à 

 100 colonies. En vue d'éviter cet inconvénient, j'ai retiré 

 de très bons résultats de la méthode que j'ai suivie et qui 

 consiste à faire des dilutions dans un liquide stérile avec 

 de petites quantités de sucs en fermentation et de bien les 

 agiter. 



Des colonies nées sur les plaques de gélatine on faisait 

 des cultures pures par piqûre dans la gélatine et des cul- 

 tures en stries sur agar. Les cultures pures servaient alors 

 à faire de nouvelles plaques pour voir si l'on obtiendrait 

 des colonies identiques à celles dont provenaient les cul- 

 tures, et, en cas afàrmatif, on procédait à des ensemence- 



(1) Holm. Des méthodes de culture pure, etc. Comptes rendus des travaux du 

 Laboratoire de Carlsherg, III, p. 1. 



