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Supposons, par exemple, que nous ayons obtenu par ce 

 moyen une culture absolument pure de la levure basse 

 n" 1 de Carlsberg; je choisis précisément cette espèce, 

 parce que c'est avec elle qu'ont été faites la plupart de mes 



1882 je publiai ma première communication sur ce sujet {Compte rendu des travaux 

 du luborut. de Carlsberg, vol. J, 4'"« livr., pages 207 et 212). 



Pour arriver à obtenir une culture absolument pure, j'employai des ballons Pasteur 

 contenant du moût de bière stérilisée, et j'opérai avec des dilutions de levures telles 

 que je ne fécondai qu'une partie des ballons ensemencés. Ce qu'il y avait de nouveau 

 dans ma méthode était surtout la découverte d'une indication pour distinguer les 

 ballons qui n'avaient reçu qu'une seule cellule de ceux qui en avaient reçu plusieurs. 

 J'avais en effet observé que les cellules séparées entre elles par une vive agitation, et 

 réiiarties dans un liquide nourricier, se déposaient plus tard sur le fond des vases à des 

 places différentes pour y former des taciies de levures tout à fait distinctes. J'avais 

 ainsi créé la première méthode exacte de dilution, que j'employai pour obtenir les 

 cultures pures des six espèces de saccharomyces que j'ai introduites en 1883 dans la 

 littérature scientifique avec plusieurs autres levures. C'est également sur cette méthode 

 que je me suis basé pour faire mes travaux sur les différents facteurs qui inter- 

 viennent dans la production des spores, sur les courbes thermiques qui régissent leur 

 développement dans les six espèces que je viens de mentionner, et sur les maladies 

 que certains saccharomyces provoquent dans la bière. 



Dès 1882, je publiai une courte communication sur les plus importants de ces tra- 

 vaux (/. c, pages 206 et 21G). J'avais donné ainsi, pour le dire en un mot, la base 

 complète de mes éludes sur les levures. Pour toutes les expériences que je fis à cette 

 époque, je me servis uniquement de milieux liquides, car on ne connaissait pas encore 

 alors le perfectionnement d'une si haute importance au point de vue technique qui 

 réside dans l'emploi de la culture sur plaques de M. Koch (dissémination des cellules 

 dans la gélatine nutritive). 



J'ai surtout donné ces éclaircissements historiques pour répondre aux affirmations 

 de quelques savants allemands qui ont tenté de démontrer que mes études avaient eu 

 pour point de départ le procédé de culture sur plaques de Koch. L'ordre chronolo- 

 gique de la publication de mes travaux montre à l'évidence l'impossibilité de ce 

 fait. M. Koch a publié, en 1883, sa méthode des plaques qu'il avait presque complè- 

 tement élaborée dès l'automne 1882. Antérieurement à cette époque, il fallait ses cul- 

 tures d'après son premier procédé beaucoup moins parfait (stries ou piqûres dans de 

 la gélatine nutritive). 



Plus tard, comme je l'ai déjà indiqué, j'ai appliqué dans beaucoup de cas le procédé 

 de la gélatine, qui présente sur celui des liquides l'avantage d'une plus grande sim- 

 plicité, mais en y introduisant une modification essentielle qui consiste à la combiner 

 avec le principe de la culture provenant d'une seule cellule; modification qui permet 

 d'obtenir une plus grande sécurité {Compte rendu, des travaux du laborat. de 

 Carlsberg, 1883 et 1886). 



Mes critiques auraient pu se convaincre de la pai faite exactitude de ce que je viens 

 de dire, s'ils s'étaient tenus au courant des mémoires qui traitent de cette question; 

 mais, tantôt ils se sont contentés de recherches bibliographiques trop superficielles, 

 tantôt ils ont été, je dois le craindre, aveuglés par la partialité. 



il faut rappeler également ici que l'on avait obtenu des cultures pures longtemps 

 avant que M. Koch et moi eussions publié nos méthodes; mais, je le répète, ces cul- 

 tures ne présentaient pas la même garantie. Malgré les grands progrès qui ont été faits 

 dans cette voie, surtout dans ces dernières années, le but visé n'est pas encore à mon 

 avis complètement atteint. 



