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et l'étendre sur les parois du tube. Le tube à essai, bouché à la 

 ouate (il est bon d'en relâcher le tampon pour faciliter l'ab- 

 sorption de l'oxygène) est placé sur un petit support en fil de 

 1er dans un tube à essai plus grand, haut de 22 à 24 «ni^ et large de 

 3 cm, contenant dans sa partie inférieure Igr. d'acide pyrogallique 

 sec, auquel on ajoute, au moyen d'une pipette, lO^m d'une solution 

 de potasse caustique à 1/10 (1 partie de liqueur de potasse caus- 

 tique et 10 parties d'eau) et que l'on ferme avec un bouchon de 

 caoutchouc neuf. A 37% tout l'oxygène d'un tube d'une contenance 

 de 100 ccm est absorbé en 24 heures; à 20°, il faut environ 2 jours. 

 Pour s'assurer de l'absorption de l'oxygène, M. Buchner a intro- 

 duit dans le tube de culture, au lieu de bouillon, de minces boules 

 de verre remplies d'une solution de pyrogallate alcalin, qu'il brisait 

 après un séjour de 24 heures à l'étuve en imprimant quelques 

 secousses au tube. La solution limpide, dénotant ainsi l'absence 

 d'oxygène que prouve, du reste, le fait que les anaérobies les plus 

 sensibles à l'action de l'air se cultivent parfaitement d'après cette 

 méthode. Après l'absorption de l'oxygène par l'acide pyrogallique, 

 il reste une atmosphère composée d'azote et d'un peu d'acide carbo- 

 nique, auxquels s'ajoute une très faible fraction d'oxyde de carbone, 

 ainsi que l'ont démontré MM. Calvert et Cloëz et M. Boussingault. 

 D'après ce dernier, la quantité d'oxyde de carbone représente 0,4 

 à 3, 4 Vo du volume de l'oxygène absorbé, et est d'autant plus forte 

 que l'oxygène est plus pur, et diminue quand l'oxygène est mélangé 

 à un gaz inerte. Dans le cas qui nous occupe, elle est donc minime. 

 On pourrait toutefois se demander s'il n'y a pas là un danger pour 

 les cultures. M. Buchner ne le croit pas, car il n'a remarqué 

 aucune influence fâcheuse sur ses cultures, et il a, au contraire, 

 pu cultiver parfaitement les anaérobies les plus marqués, tels que 

 le vibrion septique. 



Un procédé analogue à celui de M. Buchner a été décrit par 

 M. Roux dans les Annales de l'Institut Pasteur, t. I, p. 50. Ce 

 savant utilisait, on se le rappelle, la propriété que certains 

 microbes, le BaciUus subtilis, par exemple, possèdent à un haut 

 degré d'absorber l'oxygène de l'air. Pour cela, on liquéfie par la 

 chaleur la gélatine ou la gélose contenue dans un tube à essai 

 ordinaire, on la porte à l'ébullition pour chasser tout l'air, puis 

 on la solidifie rapidement en plongeant le tube dans de l'eau froide. 

 On pratique une piqûre au moyen d'un fil de platine comme à 

 l'ordinaire, et on fait tomber sur la surface de la gélatine un peu 

 de gélose liquéfiée. Quand le bouchon de gélose est solide, on 

 introduit dans le tube une culture pure de Baclllus subtilis dans 

 du bouillon et on ferme l'extrémité à la lampe. Le BaciUus subtilis 



