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Naturwissenschaftliche Wochenschrift. Nr. 44, 
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Mischt man das Tubereulin mit dem fünffachen Vo- 
lumen absoluten Alkohols, dann scheidet sich eine braune 
harzartige Masse aus, welche dem Boden des Gefässes 
fest anhaftet. Sowohl die abgeschiedene braune Masse, 
als die darüber stehende braune Flüssigkeit, welche sich 
klar abgiessen lässt, zeigen bei der Prüfung in nahezu 
gleicher "Stärke die "Pubereulinwirkung. ine Trennung 
Täskt sich also auf diese Weise nicht erreichen. 
Wenn aber Alkohol in immer grösserem Ueberschuss 
angewendet wird, dann bekommt man schliesslich statt 
der harzartigen Masse einen feinkörnigen Niederschlag 
der, wiederholt mit absolutem ATk&hor gewaschen, a 
einem gehärteten Filter unter Absaugen "gesammelt und 
im Vabıtm über Schwefelsäure getrocknet, ein fast weisses 
Pulver giebt. Um diesen Niederschlag zu erhalten, ver- 
fährt man am zweckmässigsten in der Weise, dass man 
das Tubereulin langsam in die 20- bis 25fache Menge 
von absolutem Alkohol unter fortwährendem Orrühren 
eintröpfeln lässt, nach dem Absitzen des Niederschlags 
den Alkohol abeiesst, von neuem absoluten Alkohol in 
gleicher Menge hinzufügt, dies einige Male wiederholt 
und schliesslich den Niederschlag in der angegebenen 
Weise trocknet. Wenn man es “Versucht, den alkohol- 
feuchten Niederschlag durch Erwärmen auf dem Wasser- 
bade zu trocknen, dann sintert er zusammen und wird 
bräunlich; im Vacuumexsiccator dagegen trocknet er zu 
einer weissen, schwammigen Masse, die leieht zu Pulver 
zerdrückt werden kann. Das Tuberculin giebt bei der 
Behandlung mit Alkohol etwa 10 °,, trockenes Pulver. 
Letzteres ist aber keineswegs die wirksame Substanz in 
reiner Beschaffenheit; denn es enthält neben dieser noch 
eine Menge in Alkohol unlöslicher Extraetivstoffe. Auch 
gelingt es nicht, durch absoluten Alkohol den wirksamen 
Stoff vollständig aus dem Tubereulin niederzuschlagen. 
Denn, wenn der abfiltrirte Alkohol verdunstet wird, ol 
bleibt eine gelbliche klare Flüssigkeit zurück, welche aus 
dem Glycerin und den im letzteren gelösten Substanzen 
besteht. Von dieser Flüssigkeit genügen 0,5 eem nicht 
mehr, um ein Thier zu tödten. Aber in einem Versuche 
erfolgte der Tod nach Injection von 1 cem, in einem 
anderen von 1,5) as 
Wenn nun auch durch Ausfällen mit Alkohol nicht 
die Gesammtmenge des wirksamen Stoffes aus dem 
Tubereulin gewonnen werden kann, so lässt sich doch 
auf diese Weise ein grosser Theil von unwirksamen Sub- 
stanzen entfernen und darunter vor allem das Glyeerin, 
welche auf die Lösungsverhältnisse der im Tubereulin 
enthaltenen Stoffe von Wesentlichen Einflusse sind. 
Es kam nun weiter darauf an, Trennungen des im 
Alkoholniederschlag vorhandenen Gemisches von Körpern 
zu bewirken. Zu diesem Zwecke wurden unter Mit- 
wirkung der Herren Proskauer und Prof. Brieger so 
ziemlich. alle hierfür in Frage kommenden Methoden ver- 
sucht, von denen ich nur folgende speciell erwähnen 
will: Behandlung mit Ammoniumsulfat, Magnesiumsulfat, 
Kaliumearbonat, Baryt, Phosphormolybdänsäure,, Phos- 
phoswolframsäure, Eisenacetat, Bleiacetat, Tamnin, Thier- 
kohle. Aber keine von diesen Methoden hat zum Ziele 
geführt. Entweder wurde der wirksame Stoff, wie beim 
Ammoniumsulfat, noch zu sehr durch andere Stoffe ver- 
unreinigt abg eschieden, N er verlor seine Wirksamkeit 
von vornherein, oder er liess sich nicht in wirksamer 
Form von dem "Fällungsmittel trennen. So konnte z. B. 
mit Tannin alles irkeatae aus dem Tubereulin gefällt 
werden, und der Niederschlag hatte, durch Zusatz von 
Natiumearbonat in Lösung sebracht, noch seine volle 
Wirksamkeit, aber es ist nicht gelungen, die wirksame 
Substanz nun wieder vom Tannin abzuscheiden. Viel- 
leicht hätten diese Versuche bei weiterer Fortsetzung 
doch noch Erfolg gehabt, wenn es nieht inzwischen auf 
einem anderen Wege gelungen wäre, dem Ziele näher 
zu kommen, wodurch jene Methoden vorläufig in den 
Hintergrund gedrängt wurden. Es war mir nämlich auf- 
gefallen, dass, wenn der Alkohol mit dem Tubereulin in 
einem sehr viel niedrigeren Verhältniss, wie in den 
früheren Versuchen, und zwar im Verhältniss von 2:3 
gemischt wird, es nicht zur Ausscheidung der braunen 
harzartigen Masse kommt, sondern sich ein weisser 
flockiger Niederschlag bildet, 
durch Spülen mit Alkohol von gleicher Concentration 
leicht reinigen lässt. Es wird bei diesem Versuch ein 
Theil Tubereulin (z. B. 10 cem) in ein Becherglas gethan, 
und unter Umrühren anderthalb Volumtheile (in diesem 
Falle 15 cem.) absoluter Alkohol hinzugefügt, das Glas 
verdeckt und 24 Stunden stehen gelassen. Es hat sich 
dann in der dunkelbraunen Flüssigkeit ein flockiger 
Bodensatz gebildet. Die obere Flüssigkeit wird vor- 
sichtig abgegossen, 60°, Alkohol in gleicher Menge zu- 
gegossen, umgerührt und wieder zum Absetzen hingestellt. 
Dies wird so oft, 3—4 Mal, wiederholt, bis der über dem 
Niederschlag stehende Alkohol fast ungefärbt ist, dann 
wird einige Male mit absolutem Alkohol in gleicher Weise 
gespült (in der Regel genügt dreimalige Spülung), der 
Niederschlag auf das Filter gebracht, abgesogen und im 
Vacuumexsieeator getrocknet. Er giebt dann eine schnee- 
weisse Masse, welche nach dem Trocknen bei 100° (wo- 
bei sie 7—9°/, Wasser verliert), in gepulvertem Zustande 
leicht grau gefärbt erscheint. Kleinere Mengen des 
Niederschlages kann man auch auf dem Wasserbade vom 
Alkohol befreien, ohne dass sein Aussehen dadurch 
schädigt wird, wie es bei dem mit 100°), Alkohol er- 
haltenen unreinen Niederschlage der Fall war. 
Dieser durch Ausfällen mit 60°/, Alkohol erhaltene Nie- 
derschlag übertrifft alle auf andere Weise aus dem Tuber- 
eulin hergestellten Stoffe so sehr an Wirksamkeit und ver- 
hält sich bei allen bisher mit demselben angestellten Reac- 
tionen so constant, dass man ihn als nahezu rein ansehen 
kann; vielleicht bildet er schon in Wirklichkeit das voll- 
kommen isolirte wirksame Prineip des Tubereulins. Wäh- 
rend von dem 100°%,igen Alkoholniederschlag mindestens 
50 mg erforderlich sind, um dieselbe Wirkung zu er- 
zielen wie mit 0,5 g Tubereulin, genügen von dem 
60°%/,igen Alkohoiniederschlag 10 mg; in mehreren Ver- 
suchen starben die Thiere schon auf 5 mg, in einem 
Falle sogar auf 2 mg an ausgesprochener Tubereulin- 
wirkung. Die Ausbeute beträgt etwa 1°,*). Berück- 
sichtigt man die Wirkung der gewonnenen Menge im 
Verhältniss zu derjenigen des verarbeiteten Tubereulins, 
dann ergiebt sich, dass dem Tubereulin kaum die Hälfte 
der wirksamen Substanz durch die Fällung mit 60%, 
Alkohol entzogen wird, 
Prüfung des Filtrates, von welehem nach Entfernung des 
Alkohols und Zusatz von Wasser bis zum ursprünglichen 
Volumen 0,75 bis 1,0 g zur sicheren Tödtung eines tuber- 
eulösen Thieres erforderlich ist. 
Der 60°/,ige Alkoholniederschlag, 
läufig als gereinigtes Tubereulin bezeichnen könnte, 
folg ende Eigenschaften. 
Er löst "sich im Wasser ziemlich leicht, am schnell- 
sten, wenn er in einer Reibschale mit dem Wasser ver- 
rieben wird. Eine derartige Lösung behält indessen 
nicht sehr lange Zeit volle Wirksamkeit, denn es wurde 
wiederholt beobachtet, dass sie schon nach ein bis zwei 
Wochen erheblich an Stärke der Wirkung abgenommen 
welchen man vor- 
hat 
*) Die Ausbeute lässt sich leicht steigern, wenn man mehr 
Alkohol, z. B. 65%, — 70°/, dem Tubereulin zusetzt. Dann werden 
aber nich? allein grössere 1 Mengen des wirksamen Stoffes, sondern 
auch andere Stoffe mitgefällt und man erhält kein reines Präparat. 
der sich gut absetzt und. 
und dem entspricht auch die 
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