Nr. 44. 
Naturwissenschaftliche Wochenschrift. 
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desselben lässt sich doch nur, ebenso wie beim Rohtuber- 
eulin, nieht auf Grund von chemischen Reactionen, son- 
dern durch die Prüfung am Thierkörper feststellen, und 
am Krankenbette ist in jedem einzelnen Falle bei beiden 
Mitteln die Dosis den Verhältnissen entsprechend zu be- 
messen, was sich auch dann nicht ändern würde, wenn 
die Wirkung des gereinigten Tubereulins eine absolut 
gleichmässige sein würde. 
Ob das reine Tubereulin dem Rohtubereulin etwa an 
Haltbarkeit überlegen ist, können erst weitere Erfahrungen 
lehren. Bis jetzt hat sich das Rohtubereulin als eine an 
Glycerin sehr reiche Tubereulinlösung recht haltbar er- 
wiesen. Wenigstens habe ich an den ältesten, mir zur 
Verfügung stehenden Proben des Tubereulins noch keine 
Abnahme in der Wirkung wahrnehmen können. 
So interessant und wichtig die Versuche zur Rein- 
darstellung des wirksamen Prineips aus dem Tubereulin 
in theoretischer Hinsicht auch sind, so haben sie doch 
für die Praxis bis jetzt noch keinen wesentlichen Fort- 
schritt gebracht, was mich aber nieht abhalten wird, diese 
Fragen noch weiter zu verfolgen. 
In meiner letzten Veröffentlichung über das Tubereulin®) 
hatte ich über die Herkunft desselben und seine Berei- 
tungweise so viel angegeben, wie es für den Sach- 
verständigen ausreichen musste, um den von mir ange- 
gebenen Weg verfolgen zu können. Die Angaben, dass 
das Tubereulin in den Tuberkelbaeilleneulturen enthalten 
ist, und dass man sich von dem Vorhandensein desselben 
jederzeit durch den Versuch am tubereulösen Meer- 
schweinchen überzeugen und bei Versuchen zur Ge- 
winnung des wirksamen Stoffes aus den Culturen die 
Reaction am Thiere stets als eine zuverlässige Controlle 
benutzen kann, hätte genügen müssen, um einen geschickten 
Bacteriologen zur Herstellung des Tubereulins oder eines 
gleichwerthigen Präparates zu befähigen. Wenn trotzdem 
nur ganz vereinzelte Bacteriologen sich an diese Aufgabe 
herangewagt, und, soweit ich die weitschichtige Litteratur 
zu übersehen vermag, dieselbe auch nur theilweise gelöst 
haben, so hat das eigentlich etwas Beschämendes für die 
heutigen Bacteriologen, welche, anstatt selbständig ex- 
perimentell vorzugehen, in ungestümer Weise nach einem 
Recept zur Herstellung des Tubereulins verlangen. Es 
ist mir überhaupt fraglich, ob die Art und Weise der 
Herstellung, wie ich sie befolge, schon die beste ist. Ich 
habe im Laufe der Zeit fortwährend daran verbessert 
und halte sie auch noch weiter verbesserungsfähig, hoffe 
auch, dass sich noch ganz andere geeignetere Methoden 
werden auffinden lassen. Wenn ich daher jetzt, wo die 
Beurtheilung der Tubereulinfrage eine ruhigere und mehr 
objeetive geworden ist, den richtigen Zeitpunkt gekommen 
erachte, um meine Erfahrungen über die Herstellungsweise 
des Präparates zu veröffentlichen, so würde ich sehr be- 
dauern, wenn man sich sklavisch an meine Angaben 
halten und nicht versuchen würde, etwas besseres zu 
schaffen. 
Vorweg habe ich aber noch folgendes zu bemerken. 
Bei der Tubereulingewinnung liegt der Schwerpunkt 
darin, dass man es versteht, die Tuberkelbaeillen in 
Massen zu eultiviren. Ohne solche Masseneulturen ist an 
die Herstellung des Tuberculins in nennenswerthen Men- 
gen überhaupt nicht zu denken. Tuberkelbaeillen in 
Massen zu eultiviren, ist aber nur einem geübten Bacterio- 
logen möglich, der Ungeübte wird wohl auch Massen- 
eulturen zu Stande bringen, aber keine Reineulturen; 
mit unreinen Culturen wird er nichts als Unheil anrichten, 
und er sollte deswegen seine Hände lieber davon lassen. 
*) Vergl. „Naturw. Wochensehr.“ Bd. VI, S. 53 ff. 
Red. 
Ursprünglich habe ich die Tuberkelbaeillen auf 
Glycerinpeptonagar in Reagensgläsern gezüchtet, die Cul- 
turen, wenn sie den Höhepunkt der Entwiekelung erreicht 
hatten, abspült, auf einem feinen Drahtnetz gesammelt, 
mit einer 4°/,igen Glycerinlösung übergossen, mit dieser 
Lösung auf den zehnten Theil eingedampft, abfiltrirt 
und das Filtrat verwendet. Die Züchtung auf Agar in 
Reagensgläsern ist aber sehr mühsam und giebt verhält- 
nissmässig wenig Ausbeute. Als es darauf ankam, 
grössere Mengen zu schaffen, musste daher versucht 
werden, grössere Gefässe für die Culturen zu benutzen; 
dabei ergaben sich aber Schwierigkeiten in der Verwen- 
dung des Nähragar, und ich griff auf frühere Versuche 
zurück, die ich über die Züchtung der Tuberkelbacillen 
in flüssigen Nährmedien angestellt hatte. Anfangs fielen 
die Culturen wenig befriedigend aus; sie wuchsen in der 
Flüssigkeit sehr langsam und kümmerlich., Zufällig 
machte ich dann aber die Beobachtung, dass einzelne 
platte Stückehen der Bacillenkultur, welche an der oberen 
Fläche troeken waren und unbenetzt blieben, auf der 
Oberfläche der Flüssigkeit sich schwimmend erhielten, und 
dass diese Stückchen sich in üppigster Weise entwickelten. 
Sie bildeten im Laufe von einigen Wochen an der Ober- 
fläche eine dieselbe vollkommen bedeckende, ziemlich 
dieke, oberwärts trockene, und oft faltige Haut von weiss- 
lieher Farbe. Nach 6—5 Wochen ist das Wachsthum 
beendet; die Haut fängt dann an, von der Flüssigkeit be- 
netzt zu werden, und sinkt schliesslich, in lappenförmige 
Stücke zerfallend, unter. Der Ertrag einer solchen Cultur 
ist erheblich grösser als der auf festem Nährboden 
erzielte. 
Als Culturflüssigkeit kann man ein Infus von Kalb- 
fleisch benutzen, das in der gewöhnlichen Weise hergestellt 
wird. Dasselbe muss schwach alkalisch sein und einen 
Zusatz von einem Prozent Pepton und 4—5 Prozent Gly- 
cerin erhalten. An Stelle des Kalbfleischinfuses kann 
auch einprozentige Fleischextraetlösung verwendet werden. 
Die Culturgefässe, am besten Kölbehen mit flachem 
Boden, werden nur zur Hälfte, und zwar mit 30—50 eem 
Flüssigkeit gefüllt, gut sterilisirt und dann so geimpft, 
dass ein nicht zu kleines Stück der Aussaateultur auf der 
Oberfläche der Flüssigkeit schwimmt. Die Culturen 
werden am besten bei 33° gehalten. 
In Bezug auf die Herkunft der zur Cultur benutzten 
Tuberkelbaeillen habe ich keinen Unterschied gefunden. 
Für die Wirksamkeit des Tuberkulims ist es ganz gleich- 
gültig, ob dasselbe mit frisch gezüchteten Culturen oder 
mit mehrere Jahre alten hergestellt wird, ebenso ob die 
Culturen direet vom tuberkulösen Menschen gewonnen, 
oder ob sie wiederholt durch den Thierkörper gegangen sind. 
Bei dieser Art und Weise der Züchtung geht ein 
Theil des wirksamen Stoffes in die Culturflüssigkeit 
über, wovon man sich durch Probeinjection an tuber- 
kulösen Meerschweinchen leieht überzeugen kann. Ich 
habe deswegen, nachdem ich dies bemerkt hatte, 
die Culturen nicht mehr mit wässeriger Glycerinlösung, 
sondern gleich mit der Culturflüssigkeit extrahirt, um so 
auch den in dieser enthaltenen Stoff su verwerthen. Dass 
auf diese Weise die Culturen genügend extrahirt werden, 
geht daraus hervor, dass sie nach der Extraction nur noch 
eine geringe Wirkung auf tubereulöse Meerschweinchen 
auszuüben vermögen, und dass die Culturflüssigkeit, wenn 
sie ohne die Culturen eingedampft wird, ein erheblieh 
schwächeres Tubereulin liefert. 
Die zur Extraetion verwendeten Culturen müssen voll- 
kommen reif, also 6-8 Wochen alt sein. Sie müssen 
selbstverständlich absolut rein sein, wovon man sich durch 
die mikroskopische Untersuchung jedes einzelnen Gefässes 
überzeugen muss. Erst nach langer Uebung wird man 
