Spermatocytenteilungen bei der Honigbiene. 417 



Flemmingsche Gemisch, auch wenn man es verdünnt anwendet, 

 etwas Schrumpfung verursacht. 



Die mit Paraffin durchtränkten Hoden wurden in Schnitte 

 von 6 — 7 u Dicke zerlegt und mit Eiweiss, kombiniert mit Wasser, 

 auf den Objektträger aufgeklebt. 



Zur Färbung habe ich vorwiegend Eisenhämatoxylin nach 

 der Vorschrift von M. Heide nhain (96) benutzt. Durch diese 

 Färbung kann man, wie ich bereits früher mitgeteilt habe, an 

 Material, welches mit Flemmingschem Gemisch fixiert ist, 

 ausser den Centriolen aucü noch die Mitochondrien gefärbt er- 

 halten ; nach Fixierung in Herma n n schem Gemisch bleiben 

 dagegen die Mitochondrien ungefärbt, wodurch das Studium der 

 Centriolen wesentlich erleichtert wird. 



Für die Darstellung der Centriolen sowohl wie für diejenige 

 der Mitochondrien kommt bekanntlich alles darauf an, den 

 richtigen Ausziehungsgrad bei der Differenzierung zu treffen. 



Ich verfahre daher folgendermassen : ich nehme stets zirka 

 12 Objektträger, von denen jeder mit 2 — 3 Reihen von Schnitten 

 beklebt ist, gleichzeitig in Behandlung. Die Objektträger werden 

 zunächst 1 ) für 24 Stunden in einer 2 — 2V2°/oigen Lösung von 

 schwefelsaurem Eisenoxydammon, dann (nach kurzem Abspülen 

 mit destilliertem Wasser) für ebenso lange Zeit in einer l°/oigen 

 Hämatoxylinlösung 2 ) aufgestellt. Sie werden dann, nachdem sie 

 mit Leitungswasser abgespült sind, möglichst gleichzeitig zur 

 Differenzierung in die Beizflüssigkeit zurückgebracht. Aus dieser 

 werden sie in kleinen Intervallen nacheinander wieder heraus- 

 genommen; die einzelnen bis hierher gleich behandelten Objekt- 

 träger werden demnach verschieden lange extrahiert. Sie 

 werden dann weiter mit fliessendem Wasser zirka V* Stunde lang 

 ausgewaschen und in Kanadabalsam eingeschlossen. 



Bei einem derartigen Vorgehen hat man offenbar Aussicht, 

 wenigstens in einigen Fällen, den richtigen Differenzierungsgrad 



1 Wenn es sich um Untersuchungsobjekte handelt, bei denen ge- 

 schwärzte Fettgranula den Centriolennachweis stören könnten , bringe 

 ich die Objektträger vorher auf mehrere (bis 24) Stunden in Terpentin, wie 

 ich schon 1899 in Bd. 54 dieses Archivs, S. 331, Anm., angegeben habe. 



2 ) Die 1° oige Hämatoxylinlösung bereite ich mir nach der Vorschrift 

 von M. Heidenhain (96) in der Weise, dass ich 1 Teil einer vorrätig ge- 

 haltenen 10° o igen alkoholischen Lösung von Haematoxylinum purissimum 

 mit 9 Teilen destillierten Wassers verdünne. 



