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no caldo. Da ultima diluição assim ob- 
tida, retirámos com pipeta normal, 1,00 c. c. 
que colocavamos em tantos tubos quan- 
tas as observações que 
zer: 
eram de vidro rezistente de Ehrhardt e Metz- 
ger de Darmstadt, (R-Glas), e submetidos a 
ação do vapor d'agua como indica ABEGG, e 
em seguida, depois de esgotados e secos eram 
fechados com rolha de borracha esterilizada 
pela ebuliçäo e seca. Os tubos eram, entáo, 
levados a um termostato modelo OSTWALD, 
previamente regulado para a temperatura ma- 
xima provavel do dia da experiencia, 27,0 
gráos centigrados; a agua era mantida em 
contante ajitação por meio de turbina. A 
temperatura da agua ocilava em limites de 
0,05 de gráo. A temperatura do exterior 
era, na ocaziáo da colocacáo dos tubos no 
termostato, de 260, e pouco decreceu no de- 
curso dos 105 minutos que durou a expe- 
riencia. Os tubos, apezar disto, permanece- 
ram sempre no termostato e somente ficaram 
á temperatura do laboratorio o tempo estri- 
tamente necessario para nelles se colocar o 
agar e derramal-o em placas. Depois de 
feita a I observação — tempo 0 — analoga 
ás adiante descritas, retiravamos, de 15 em 
15 minutos, um tubo ao qual adicionavamos 
10 c.c. de agar fundido e esfriado a 440. O 
tubo era ajitado 5 vezes por movimento 
de bascula, para egual repartição dos micro- 
bios; o agar era então derramado em placas 
de Petri. Com cada tubo faziamos 2 placas: 
a 1.2, na qual havia uma camada de agar que 
se gelificára, estando a placa imovel, de 
modo a formar superficie horizontal, rece- 
bia o agar semeado. Esta 1.2 placa recebia 
a quazi totalidade dos germens. No tubo 
com o qual se tinha preparado a 1.2 placa 
derramava-se nova porção de agar fundido e 
esfriado a 440, destinado a acarretar os mi- 
crobios existentes na porção restante de agar 
aderente as paredes do tubo. Com esta nova 
porção de agar preparava-se a 2.4 placa pelo 
processo habitual. 
As placas assim feitas apoz completa ge- 
lificação — cerca de 10 minutos — eram le- 
vadas para estufa regulada a 370. 
pretendiamos fa- | 
Os tubos de ensaio que empregámos | 
No in- | 
derselben Herstelluug gemachten, Kultur so- 
viel zugesetzt, als nóthig war, um eine leichte, 
aber deutliche, Trúbung zu erzielen. Von die- 
ser ersten Verdünnung wurden 0,05 cc. einem 
Tubus zugesetzt, der eine gleiche Quantitát der 
gleichen Nahrfliissigkeit enthielt; von der so 
hergestellten Verdiinnung entnahm ich 0,05 cc. 
für einen dritten Tubus. Natürlich wurden 
die Mischungen sorgfáltig geschüttelt, um eine 
gleichmássige Verteilung der Keime in der 
Bouillon zu erzielen. Von der letzten so her- 
gestellten Verdünnung entnahm ich mit einer 
Normalpipette je 1 cc. fiir so viele Tuben, als 
ich zu den Beobachtungen gebrauchte. Die 
verwendeten Reagenzgläschen waren aus R.- 
Glas von EHRHARDT und METZGER in Darm- 
stadt und wurden nach der Angabe von ABEGG 
mit Wasserdampf behandelt und nach dem 
Trocknen mit einem, durch Auskochen sterili- 
sirten, trockenen Gummipfropfe verschlossen. 
Die Róhrchen wurden hierauf in einen Ther- 
mostaten von OSTWALD gebracht, der zuvor 
für die wahrscheinliche Maximaltemperatur 
des Versuchstages, 27” Centigrade, regulirt 
war, wobei das Wasser durch eine Turbine 
in bestándiger Bewegung erhalten wurde. Die 
Wärme des Wassers schwankte innerhalb ei- 
ner Grenze von 0,05 Graden, wáhrend die 
Aussentemperatur 26° betrug, als die Róhr- 
chen in den Thermostaten gebracht wurden 
und während der 105 Minuten, welche der 
Versuch dauerte, nur wenig abnahm. Uebri- 
gens blieben die Tuben doch immer im Ther- 
mostaten und wurden der Laboratoriumstem- 
peratur nur so lange ausgesetzt, als für den 
Zusatz von Agar und das Giessen von Platten 
unbedingt nótig war. Nachdem die erste Be- 
obachtung (Zeit — Null) nach Art der unten 
beschriebenen gemacht war, entnahm ich von 
15 zu 15 Minuten ein Róhrchen, dem ich 10 cc. 
geschmolzenen und auf 44º abgekiihlten Agars 
zusetzte. Dasselbe wurde fünf mal durch 
Schaukelbewegung geschüttelt, um eine gleich- 
mässige Verteilung der Microbien zu erzielen 
und der Agar darauf in Petrischalen ausge- 
gossen. Mit jedem Tubus machte ich zwei 
Platten; die erste enthielt eine Agarschicht, 
welche ohne Bewegung der Platte erstarrt war, 
sodass sie eine horizontale Oberflache darbot 
