matoxilina ferrea de HEIDENHAIN. Na maioria 
dos cazos puderam ser caraterizados os cor- 
pusculos de Guarnieri, tipicos da variola. 
Esforçámo-nos por libertar, tanto quanto 
possivel o virus do sôro e da albumina, la- 
vando-o radicalmente por muito tempo, o que 
simultaneamente, o enriquecia. Para isso 
conseguir, a exemplo do que já havia sido 
feito com o virus da Hiihnerpest, filtrámos o 
material fresco atravez de camadas coloidais 
(agar a 3°/,). Foi observada a seguinte tec- 
nica: Um filtro de papel bem molhado com 
agua fiziolojica era colocado no interior dum 
pequeno funil a cujas paredes era fixado por 
um cone de platina e tornado aderente a ellas 
por meio da aspiração exercida pela trompa 
d'agua. Por 3 ou 4 vezes; sobre o filtro era 
lançado o agar de maneira a todo o papel 
ficar por elle impregnado e que um pequeno 
depozito do material se acumulasse no fundo. 
Condição capital para o sucesso da filtração 
é que o agar impregne igualmente toda su- 
perficie do filtro de papel, sem que se for- 
mem lacunas. Impregna-se o filtro, lançando 
sobre elle certa porção de agar liquefeito, 
girando o aparelho em pozição horizontal, de 
maneira que o coloide se solidifique, formando 
tenue camada. 
Apóz solidificação do agar, lança-se sobre 
o filtro o filtrado, já a algum tempo obtido 
pela passajem atravéz do papel de material 
de pustulas, um pouco diluido em agua fi- 
ziologica e deixa-se filtrar por aspiração lenta 
durante 1 á 3 hóras. (Fig. 1). 
A filtração deve ser acompanhada cuida- 
dozamente e sob continua vijilancia, porquanto 
apóz a passajem das ultimas porções de li- 
quido a camada coloidal facilmente se fende 
e, nesse cazo, o filtrado é inutilizavel. O te- 
nue depozito obtido sobre a massa de agar é 
estendido para preparados em laminas com uma 
alça de platina; são estes desecados, privados 
do resto de sôro por lavajens sucessivas com 
agua distilada, de novo desecados e fixados 
durante algumas hóras em alcool absoluto e 
córados com a fucsina anilinada de LOEFFLER. 
Para se obter maiores porções de filtra- 
dos procedeu-se, segundo os conselhos de 
GIEMSA, do seguinte modo: 
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pfungen an der Kaninchenkornea vornehmen. 
Die geimpfte Kornea wurde nach 48 Stunden 
sorgfältig herausgenommen, in Sublimatalkohol 
fixiert, in Paraffin eingebettet und die Schnitte 
in den meisten Fällen mit HEIDENHAINS Ei- 
senhämatoxylin gefärbt. In der Mehrzahl der 
Fälle wurden in den Schnitten die auch für 
die Variola typischen GUARNIERI'schen Xôrper- 
chen nachgewiesen. 
Unser Bestreben ging aber dahin, das Virus 
móglichst von dem Serum und dem Eiweiss 
zu befreien, es lângere Zeit griindlich zu wa- 
schen und gleichzeitig in grósseren Mengen 
anzureichern. Zu diesem Zwecke filtrierten 
wir das frische Material nach Analogie der 
Filtrationsversuche bei der Hiihnerpest durch 
Kolloidschichten (Agar-Agar 3°/,). Es wurde 
folgende Versuchsanordung getroffen: Ein 
mit physiologischer Kochsalzlôsung benetzter 
Filterpapiertrichter wurde mit Hilfe eines Pla- 
tinkonus in einen kleinen Glastrichter dicht 
durch Ansaugen mit einer Wasserstrahlpumpe 
sorgfältig eingefiigt und dann 3—4 mal mit 
Agar- Agar derart durchtrânkt, dass die Sub- 
stanz überall den Papierrand überdeckte und 
an der Basis einen kleinen Agarschichtkegel 
bildete. Ein Haupterfordernis fiir gute Filtra- 
tionsresultate ist, dass die Agarsubstanz gleich- 
mássig den Papiertrichter durchtrankt und 
lückenlos bedeckt; bei der Durchtränkung ver- 
fährt man derart, dass man den flüssigen Agar 
jedesmal aus dem Trichter, den man in ho- 
rizontaler Lage rotiert, hinausgiesst und den 
geringen Rest des Kolloids in Form einer 
dünnen Schicht erstarren lässt. 
Nach dem Erstarren des Agars wurde nach 
einiger Zeit das vorher durch Papier filtrierte, 
etwas mit physiologischer Kochsalzlôsung ver- 
dünnte Pustelmaterial unter mässigem Druck 
langsam in 1-3 Stunden hindurchfiltriert. (Text- 
figur 1). 
Die Filtration muss vorsichtig unter steter 
Kontrolle erfolgen, weil nach dem Passieren 
der letzten Flüssigkeitsmenge die Kolloidgal- 
lertschicht des Agarkegels sich leicht spaltet 
und das Filtrat unbrauchbar wird. Der leichte 
Belag des Agarkegels wurde dann mit der 
Platinôse zu Ausstrichen verarbeitet, diese 
wurden hierauf getrocknet, der Serumrest 
