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culato o 3 matou, inoculado na mesma oca- 
zião e doze, o vitelo 2 ; a cultura inoculada 
no 5 tambem matou em identicas condições 
o 6 e 7; as culturas que inoculámosno 55 e 
s6 eram muito ricas em esporos. Alguns 
vitelos (17, 18, 23 e 24) foram inoculados 
com o material 1, do qual já tratámos no 
quadro n. 2. 
Fizemos por essa ocazião a vacinação 
na fazenda do Dr. VILLAÇA, em Juiz de 
Fora e todos os vitelos assim tratados rezis- 
tiram, não só á infeção natural, como á ino- 
culação de prova. Mais tarde tivemos, em 
24 vitelos vacinados, 8 mortes. Esse aci- 
dente veio esclarecer definitivamente o pro- 
blema da vacinação e mostrar que vacinas 
que são inocuas para cobaias não garantem 
a auzencia de cazos por ocazião da vacina- 
ção. Estas culturas que se mostraram ricas 
em esporos não eram, porem, quando ino- 
culadas em cobaias, mortais para ellas, ou, 
em outras palavras, a doze minima mortal 
para os vitelos póde estar abaixo da doze 
mortal minima para a cobaia. 
Como consequencia passámos a dozar 
as nossas culturas vacinantes pela conta- 
jem do numero de esporos em 1/2 c. c., 
isto é, ‘/« da doze que inoculamos como 
vacina. Para esta dozajem ajuntámos 0.5 
de centimetro cubico da vacina a 6—8 de 
soro de cavalo, esta mistura é feita em um 
tubo de ensaio, no qual se adiciona final- 
mente a quantidade de agar glicozado 
para que o tubo fique quazi cheio, ajita-se 
bem, e, quando gelificado, coloca-se na es- 
tufa a 37º. No 2.º dia as colonias podem 
ser contadas e não devem exceder de 200, 
porem é, somente, na maioria das vezes, de 
apenas algumas dezenas. 
A pratica de milhares de inoculações 
mostrou que uma só inoculação é suficiente 
para conferir a imunidade durante todo o 
tempo em que são os animais habitualmente 
atacados. A conservação das propriedades 
destas culturas tem se mostrado muito 
longa. Nos frascos fechados á lampada, 
como é fornecida, é de muitos mezes. 
Na falta de estatistica regular apre- 
tué dans les mêmes conditions le témoin 
Rs 24 
La culture inoculée au veau n. 5 a tué 
les témoins ns. 6 et 7 ; les cultures inoculées 
aux animaux n. 55 et 56 étaient très riches 
en spores. 
Quelques veaux (ns. 17, 18, 23 et 24) 
ont été inoculés avec le matériel 1 dont 
nous avons parlé au tableau n. 2. 
Nous avons essayé le vaccin en grand, 
à la ferme de Mr. le Dr. VILLAÇA, à Juiz 
de Fóra où tous les animaux immunisés ont 
résisté à l’infection naturelle et à une ino- 
culation d’épreuve. 
Plus tard dans un autre essai nous 
avons eu 8 morts parmi 24 veaux vaccinés. 
Cet accident est venu résoudre d’une 
façon définitive le problème du vaccin et 
nous a montré que le vaccin non virulent 
pour le cobaye peut donner des cas parmi 
les veaux et ainsi nous avons vérifié que la 
dose minima mortelle pour les veaux est au 
dessous de la dose minima mortelle pour les 
cobayes. 
Nous avons alors dosé notre vaccin en 
faisant la numération des spores dans 1/2 
cc. de vaccin, c’est à dire dans le quart de 
la dose vaccinante. Pour faire cela nous 
ajoutons à o,5 cc. de vaccin 6 à 8 cc. de 
sérum stérile de cheval. Ce mélange est 
fait dans un tube d’essai dans lequel on 
verse après, la quantité d’agar-glycosé suf- 
fisante pour le remplir à peu près. On 
agite le tout et on laisse prendre le milieu 
qui est, alors placé à l’étuve à 379 C. Au 
deuxième jour on fait la numération des co- 
lonies, qui ne doivent pas surpasser le nu- 
méro 200. À la majorité des cas il n’y en a 
même que quelques dizaines. 
La pratique de nombreuses, vaccina- 
tions a démontré qu’une seule inoculation est 
suffisante pour immuniser les animaux pen- 
dant le temps qu’ils ont plus de receptivité. 
Le vaccin se conserve assez longtemps ; 
pendant beaucoup de mois il se conserve 
actif dans les flacons fermés à la lampe, où 
il est fourni. En défaut d’une statistique 
nous présentons ci-dessous les nombres 
