BACILO DE PFEIFFER EN LA GRIPPE 117 



y fácilmente, como si la acción sufrida por los líquidos anteriores 

 le dejase mejor preparado para teñirse por la fuchina. Además del 

 germen típico, en algunos casos hemos encontrado un tipo de ta- 

 maño algo mayor que el corriente ; en los cultivos, ambos tipos son 

 indiferenciables. 



Para la siembra hemos seguido el procedimiento de Scheller, 

 preparando el esputo lo mismo que para el examen microscópico 

 y emulsionando el grumito de mucina en unos centímetros cúbicos 

 de caldo estéril. A favor del predominio del bacilo de Pfeiffer, 

 sobre los demás gérmenes, esta dilución favorece extraordinaria- 

 mente el aislamiento. Basta una gota extendida con varilla Dri- 

 galski en dos placas, sucesivamente, para obtener un cultivo casi 

 puro del microbio en la mayoría de los casos: en algunos, comple- 

 tamente puro. 



En vez del procedimiento de Pfeiffer de sembrar en agar co- 

 mún, sobre cuya superficie extiende antes o después de la siembra 

 unas gotas de sangre directamente tomadas de la vena del ala de 

 la paloma o del dedo humano, empleamos, al principio, el método 

 de Csaplewski, que utilizaba placas de mezcla de agar y sangre de 

 paloma. Basándonos en las experiencias clásicas de Pfeiffer de 

 que la hemoglobina es la única substancia de la sangre necesaria 

 para el desarrollo del germen de Pfeiffer, creíamos que se favo- 

 recía este desarrollo, hemolizando previamente la sangre y mez- 

 clándola después con el agar. Procedemos recogiendo 10 o 12 gran- 

 des gotas, obtenidas por punción aséptica de la vena del ala de la 

 paloma, en un matracito de boca ancha con 15 o 20 centímetros de 

 agua destilada y estéril. Agitando el matraz, la sangre queda des- 

 fibrinada y hemolizada; después se mezcla con 100 o 120 centí- 

 metros cúbicos de agar fundido y enfriado a 55°, que se vierte rá- 

 pidamente en placas. 



En este medio así preparado, las colonias tienen indudablemente 

 un tamaño algo ma3'-or (especialmente en primera generación) y 

 son más abundantes que en el medio con la sangre sin hemolizar, 

 y, sobre todo, que sembrando directamente en agar y extendiendo 

 después la sangre sin desfibrinar. La coagulación parece que im- 

 pide que la hemoglobina pueda ser utilizada por los microbios. 



Hemos usado sangre de conejo, de paloma y humana; el desarro- 

 llo es mucho mejor en estas últimas que en la primera. Casi siem- 

 pre hemos usado la de paloma. También hemos empleado los gló- 

 bulos humanos sobrantes de centrifugación del suero procedente 



