66 Hans Held: 



einander vereinigten Geschlechtszellen eine un- 

 gleiche Dif f er enzierungs grosse bei bestimmten Beiz- 

 ftärbungen besitzen. Es gelingt unter gewissen Bedingungen 

 leicht, die eine Art von Granulis ganz oder nahezu vollständig 

 zu entfärben, während die andere noch intensiv gefärbt bleibt. 

 Diese Differenz ist im Anfang der Befruchtung so gross, dass 

 jene Prozedur selbst auf über 30 /f dicken Celloidinschnitten 

 glatt gelingt. Bei bestimmter Fixierung, Beizung und Vorfärbung 

 lassen sich also die groben Granula der eingedrungenen 

 Spermie sowohl, wie ihre soviel kleiner gewordenen 

 Teilungsprodukte leicht gegenüber den Eigranulis 

 entfärben, so dass sie dann mit einer Kontrastfarbe, die aber 

 wiederum zu differenzieren ist, nachgefärbt werden können. 

 Für diese Doppelfärbung habe ich die Alt mann sehe Fuchsin- 

 pikrinsäuremethode verwandt und mit ihr als erste Färbung oder 

 Vorfärbung die vor einigen Jahren von mir angegebene Molybdän- 

 hämatoxylinfärbung kombiniert, welche so intensive Farbtöne 

 liefert, dass sie nicht so leicht von dem Farbwert des nach- 

 folgenden Fuchsins und der Pikrinsäure unterdrückt oder auf- 

 gehoben wird. Die Molybdänhämatoxylinfärbung allein lässt nach 

 ihrer Differenzierung im Eiprotoplasma zahlreiche dunkelschwarz 

 gefärbte Granula übrig und dazwischen andere, die blass gelblich 

 erscheinen. Das sind also zwei Arten von Eigranulis, die ich als 

 schwarze und gelbeEigranula zunächst unterscheiden will. 

 Von den mehr oder weniger weissgelblich entfärbten 

 groben Granulis der Spermie lassen sich die ersteren ohne weiteres 

 und die letzteren unter gewissen weiteren Bedingungen leicht unter- 

 scheiden. Es entfärben sich die gelben Eigranula noch schneller 

 wie jene und besitzen, was für den Erfolg der ganzen Doppel- 

 färbung wichtig ist, eine geringere Affinität zur Fuchsinfärbung. 

 Mit der Pikrinsäure allein lassen sie sich nicht immer völlig ent- 

 färben. Schickt man aber eine zweite und besondere Entfärbung 

 nach, so gelingt es dann, diese zweite Art von Eigranulis als nur 

 noch gelb gefärbte von den intensiv rot leuchtenden Granulis der 

 eingedrungenen Spermie optisch zu trennen. Der Erfolg dieser 

 Doppelfärbung ist schliesslich, wenn alles richtig abgepasst worden, 

 ein ganz auffälliger. Sehe ich von gewissen Würmern ab, bei 

 denen sich die befruchtenden Spermien zur Fuchsinfärbung 

 refraktär verhalten, oder von sonst nur sehr vereinzelten 



