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mais tarde, RICKETTS, fa7endo estudos 

 sobre esta infeção, pesquisou em cobaias 

 inoculadas, precipitinas e anticorpos de Bor- 

 det. 



Para isto empregou culturas de 3 anos, 

 em agar glicosado a 1° o, caldo glicosado a 

 lo/o, agar acido e caldo acido a lo/o. Alem 

 deste material empregou ainda um extrato 

 de oidiomicelo, usando de cultura de tres 

 semanas a um mez, que depois de retirada 

 do meio de cultura era levada ao secador. 

 Pesado o material seco. ajitava com egual 

 volume de areia esterilisada e com bolas de 

 porcelana, para depois preparar emulsão com 

 lOcc de solução salina a 0,85o;o. 



Aos poucos adicionava solução salina 

 até completar o volume de 50cc, centrifugava 

 e retirava o liquido que era conservado em 

 vidro esterilisado e de novo ajitava o sedi- 

 mento com outra solução salina ate que não 

 existisse célula que não estivesse destruida. 

 Nesta ocasião emulsionada cada grama de 

 germe morto em 100 cc de veiculo, garantida 

 a esterilidade do produto, que é amarelado 

 e opalecente, com 0,5 o o de acido fénico e 

 0,3% de clorofórmio, estava preparado o 

 antijeno. 



As pesquisas de aglutininas, substancias 

 liticas, e anticorpos fixadores de complemen- 

 to resultaram sempre negativas mesmo em 

 cobaias de recente imunisação. 



Na pesquisa de precipitinas verificou, 

 após 24 a 96 horas de permanencia na ge- 

 leira, dos tubos, que passaram antes 2 horas 

 na estufa a 37 gráos, resultados, que consi- 

 derou positivos, porque os testemunhas conti- 

 nuavam claros. Encontrou o maior numero 

 de resultados positivos entre os animais ino- 

 culados exclusivamente com extrato, sendo 

 raro, este resultado nos inoculados unica- 

 mente com germe. Estes resultados são en- 

 tretanto prejudicados por um ensaio positivo 

 verificado em 96 horas com soro de cobaia 

 normal diluido a 1/10. 



Nos ensaios de fixação de complemento 

 RICKETTS empregou 0,1 de emulsão de 

 oidiomiceto, moderadamente turva, 0,1 de 

 extrato recente ou 0,15 cc de precipitado 



alcoólico de extrato, depois diluido com so- 

 lução fisiolojica. 



Para ilustração propria, fizemos verifica- 

 ções de aglutinação e de fixação de comple- 

 mento com soro de cães e coelhos, inocula- 

 dos no laboratorio com diversos escantilhões 

 de esporotrico, com blastomyces e outros co- 

 gumelos e de que talvez falaremos em outra 

 publicação mais detalhada; pois o que nos 

 leva a publicar o presente artigo é a serie de 

 resultados positivos em ensaios de fixação 

 de complemento em diversos doentes, em que 

 a pesquiza clinica e o exame microscópico 

 firmaram o diagnostico de biastomicose. 



Não são simples verificações, e sim, os 

 primeiros resultados neste sentido publicados 

 em casos de infeção humana e, por isto, não 

 deixam de ter interesse e merecer rejisto. 



Logo ao iniciar, e mais tarde, no correr 

 dos trabalhos, preparamos quantidade sufi- 

 ciente de antijeno, que conservado na gelei- 

 ra, permitiu nos realisar durante muito tempo 

 as pesquizas e, se assim não procedêssemos, 

 veríamos tolhidos nossos esforços, porque 

 perdemos a cultura, que nos prestou exce- 

 lentes serviços e que foi isolado por OASPAR 

 VIANNA de um doente que observou em 

 companhia do Prof. MIGUEL PEREIRA. E' 

 verdade que, depois disto, recebemos do Dr. 

 A. PEDROSO, de S. Paulo, escantilhões de 

 blastomyces, por ele isolados, e que manti- 

 dos durante algum tempo no laboratorio, ti- 

 veram egual aplicação em nossas pesquizas. 



Aproveitamos a ocasião para agradecer a 

 gentileza com que atendeu a nosso pedido. 



Para preparo do extraio empregámos 

 culturas bem desenvolvidas, que nunca eram 

 de menos de seis mezes, em agar de Sabou- 

 rad, contendo maltose umas, e glicose outras 

 e, em gral esterilisado, triturámos longamente 

 a cultura em suspensão em solução fisioloji- 

 ca a 0,85 o/o. Depois disto, ajitámos a emul- 

 são com bolas de porcelana em vidro esteri- 

 lisado durante 24 horas e em seguida filtrá- 

 mos em papel Chardin e, ás vezes, em vela 

 Berkefeld, adicionando ao filtrado 0,5 o/o de 

 acido fénico. Para preparo da emulsão em- 

 pregámos a mesma técnica quanto á tritura- 

 ção, excluimos a ajitação e filtramos em algo- 



