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Naturwissenschaftliche Wochenschi'ift. 



Nr. 17. 



erzielte man durch .Vinvendung fester Nährböden. Die 

 Brauchbarkeit derselben hatte man dadurch erkannt, dass 

 Scheiben gekochter Kartoffeln, welche einige Zeit an der 

 Luft gelegen hatten und daini, vor dem Austrocknen ge- 

 schützt, weiter aufbewahrt wurden, nach 1 oder meh- 

 rei'ou Tagen auf der Oberfläche eine Anzahl verschieden- 

 fai-biger Pünktchen zeigten, die sich ziemlich schnell ver- 

 grösserten und bald die ganze Oberfläche bedeckten. Die 

 nähere Untersuchung lehrte, dass jene Püncktchen An- 

 häufungen, „Kolonien" von Bakterien waren, und dass 

 überraschender Weise jede Koh)nie stets nur Individuen 

 einer einzigen Art enthielt. Diese anfangs auffallende 

 Thatsache hatte man sehr. bald richtig dahin gedeutet, 

 dass jede Kolonie die Stelle bezeichnete, wohin aus der 

 Luft eine einzige Spore niedergefallen war und sieh von 

 anderen Arten unbehindert zu einer Kolonie der betref- 

 fenden Art, zu einer ,, Reinkultur" entwickelt hatte. 



Dieser grosse Vorzug der festen Nährböden vor den 

 flüssigen wurde von Koch sehr bald als ein wichtiges 

 Hilfsmittel erkannt um aus Baktei'iengemengeu die ein- 

 zelnen Arten für sich auszusondern. Entnimmt man 

 nämlich mittels eines keimfreien Messers ein wenig 

 „Impfstoff" aus einem Bakteriengemenge, streicht ihn in 

 möglichst dünner Schicht auf die ebene Fläche einer 

 halbierten, gedämpften Kartoffel, so entwickeln sich nach 

 einigen Tagen grössere Kolonien. Das eigentümlich ge- 

 fleckte Aussehen dieser Kolonien beweist, dass sich be- 

 reits Gruppen gebildet haben, die vorwiegend aus Indi- 

 viduen einer einzigen Bakterienart bestehen. Dadurch, 

 dass man aus jeder durch ihre Fai'be sieh abhebenden 

 Gruppe ein wenig entnimmt und das obige Verfahi'en 

 (die „Verdünnung" des Impfstoffs) wiederholt, gelingt es 

 sehr bald Kolonien zu bekommen, die immer nur eine 

 einzige Art enthalten, also „Reinkultiu'en" der betreffen- 

 den Arten darstellen. 



Um den Nährboden vor dem Austrocknen zu 

 schützen, und besonders um die in der Luft schweben- 

 den Keime abzuhalten, müssen die Kartott'elscheiben so- 

 fort nach der „Impfung" in eine „feuchte Kammei'" ge- 

 bi'acht werden, d. h. in eine mit einem gut schliessenden 

 Deckel versehene Glasschale*), deren Boden mit feuchtem 

 Eiltrierpapier ausgekleidet ist. Aus obigen Gründen 

 muss auch das Impfen frischer Nährböden möglichst 

 schnell geschehen ; auch darf beim Entnehmen des Impf- 

 stoffs der Deckel der feuchten Kammer nur wenig ge- 

 lüftet werden. 



Die festen Nährböden hatten trotz dei' oben geschil- 

 derten Vorzüge aber doch den grossen Nachteil, dass sie 

 undurchsichtig und somit für direkte mikroskopische Be- 

 obachtung unbrauchbar waren. Auch diesen Mangel 

 wusste Kochs Erfindungsgabe zu beseitigen. Dadurch, 

 dass er der als Nährflüssigkeit sehr geeigneten Eind- 

 fleischbouillon eine gewisse Menge von bester französi- 

 scher Gelatine beimischte, gelang es ilnn, eine allen An- 

 forderungen genügende Nährsubstanz herzustellen. Um 

 den Nährwert der Bouillongelatino zu erhöhen emi)fiehlt 

 es sich, noch eine gewisse Menge von Pepton (lösliches 

 Eiweiss) zuzusetzen. Bei gewöhnlicher Zimmertemperatur 

 bildet diese Peptongelatine eine durchsichtige, nahezu 

 farblose, gallertartige Masse; bei mehr als 24° wird sie 

 dünnflüssig und kann daher auch als flüssiger Nährboden 

 Verwendung finden. 



*) Am einfachsten bedient man sich hierzu einer mittelgrossen 

 Krystallisierschale mit glattgeschittenem , hohem Rande, auf welche 

 man eine zweite von etwas grösserem Durchmesser umgekehrt als 

 Deckel aufsetzt. 



Wie oben erwähnt, sind künstliche Reiukultm-en 

 fortwährend durch das Eindringen fremder Keime be- 

 droht. Um letzteres zu verhüten, mussten selbstverständ- 

 Uch die Hilfsmittel der Untersuchung, Apparate, Reagentien 

 etc. fortwährend verbessert werden.» Die von den früheren 

 Foi'sehern erprobten Methoden sind in den letzten Jahren 

 namentlich von Koch und dessen Schülern weiter aus- 

 gebildet und derart verbessert worden, dass ein berech- 

 tigter Einwand gegen tlie auf diesem Wege erlaugten 

 Resultate nicht mehr geltend gemacht werden kann. 



Wer eine bakteriologische Untersuchung beginnen 

 will, muss vor allen Dingen seine Hände und sämtliche 

 Apparate und Instrumente „sterihsieren", d. h. keimfi'ei 

 machen. Das Sterilisiei'en der Hände geschieht am besten 

 durch Waschen mit 1 pro mille Subhmatlösung,*) noch- 

 maliges Waschen mit Alkohol und Nachspülen mit Aether, 

 den man auf den Händen ver'dunsten lässt. Die nötigen 

 Instrumente werden unmittelbar vor und nach dem jedes- 

 maligen Gebrauch durch die Flamme eines Bunsen'schen 

 Breinieis gezogen. Die Kulturgefässe (Glaskolben, Glas- 

 platten und Reagensgläser) werden im Trockenschrank**) 

 eine halbe Stunde lang einer Hitze von mindestens 160" 

 ausgesetzt. Um fremde Keime abzuhalten, werden die 

 Kulturgefässe vor dem Sterilisieren mit einem mindestens 

 2 cm hohen Wattepropf verschlossen, der also mit steri- 

 lisiert wii'd und erfahi'ungsgemäss für die in diM- Ijuft 

 schwebebenden Keime undiu'chlässig ist. 



Fig. 20 



Fia-. 21. 



Die Kulturgefässe müssen nun mit einer ebenfalls 

 keimfreien Nährsubstanz gefüllt („beschickt") werden, wozu 

 sich in den meisten Fällen die Koch'sche Peptongelatine 

 eignet. Da während der Beschickung eine Infektion 

 durch Keime aus der Luft möglich ist, so müssen die 

 entsprechend gefüllten und sofort wieder mit dem sterilen 

 Wasserpfropf veistopften Gefässe nochmals sterilisiert 

 werden, ehe sie zur Anlegung einer Reinkultur verwendet 

 werden dürfen. 



Das Sterilisieren geschieht am besten im Koch sehen 

 Dampf-Steriüsierungs-Cylinder [vergl. Fig. 20 f) Aussen- 



*) D. h. einer Autiosung von 1 gr Quecksilberchlorid (Hg CU) 

 in 1 Liter Wasser, wozu man noch ein wenig Salzsäure beimischt. 

 Diese Lösung ist so ausserordentlich giftig, dass sie die meisten 

 Bakterienkeime fast augenblicklich tötet. 



**) Einem mit doppelten Wänden versehenen, aus starkem 

 Eisenblech bestehenden, vcrschliessbaren Kasten, welcher mit Gas 

 geheizt wird. 



t) Um bei Verweisen auf meme 1. Abliandlung Ud. 111 S. 2.5 ff. 



