Nr. 21. Centralblatt für Physiologie. 563 



muthet in seiner zweiten Arbeit, dass der von mir neuerdings wieder beschriebene 

 Farbstoff, der durch die Einwirkung von Alkalien auf Methylenblau entsteht, die 

 schönen Resultate bei der Romano wsky-Zieniann'scben Färbung erzielen helfe, 

 indem er sieh gleichzeitig bilde. Ich selbst glaubte anfänglich, dass der reine kry- 

 stallinisehe Farbkörper, das Eosin-Metbylenblau, in überschüssigem Methylenblau 

 gelöst, die Färbung erzeugte. Ich stimme jedoch jetzt, nach mannigfachen Versuchen 

 mit der reinen Farbe, Noeht und Ziemann bei, dass jedenfalls der rothe, übrigens 

 auch die anderen Farbstoffe eine grosse Bedeutung bei der Färbung haben. Nocht 

 hat (1. c.) ein, wie er angibt, für die Plasmodienfärbung vorzügliches Gemisch 

 lediglich durch die Beimischung des rothen Farbkörpers zum Eosin-Methylenblau 

 erzielt, den er aus alkalischem Methylenblau durch Chloroform extrahirte. Für 

 die Blut- und Gewebsfärbung allerdings eignet sieh seine Gombination nicht, viel- 

 leicht weil eben noch die anderen Nebenfarbstoffe fehlen. 



Sämmtliche Farbkörper fanden sich sowohl in der Mutterlauge, 

 welche nach Auskrystallisation des Eosin-Methylenblau abfiltrirt wurde, 

 als auch in dem krystallinischen Kückstande, so dass nicht nur das 

 Waschwasser diese Nebenfarbstoffe enthielt, sondern auch die Krystalle 

 nach ihrer Wiederauflösung in Alkohol und nochmaliger Ausfällung 

 wiederum nicht unerhebliche Quantitäten der Nebenproducte in der 

 Mutterlauge zurückliessen. Auch die Nebenfarbstoffe konnten, wenn 

 auch minder leicht und selten wohl ausgebildet, aber doch krystallinisch 

 erhalten werden; die Annahme war gerechtfertigt, dass der kystallinische 

 Niederschlag des Eosin-Methylenblau mit Krystallen der anderen 

 Farbstoffe verunreinigt ist. 



Was nun die Löslichkeitsverhältnisse der anderen Farbstoffe be- 

 trifft, so sind dieselben doch einigermaassen verschiedenartig, so dass 

 es mir bis jetzt wohl gelungen ist, die einzelnen Körper zu isoliren, 

 aber noch nicht, sie rein darzustellen. 



In Alkohol sind alle fünf Substanzen nicht ganz gleich löslich. 



Verhältnismässig am schwersten ist das Eosin-Methylenblau 

 löslich, so dass beim Eindampfen seiner alkoholischen Lösung zum 

 Auskrystallisiren die anderen Farbstoffe in der Mutterlauge bleiben. 



Noch stärker zeigt sich der Unterschied mit Chloroform; auch 

 in ihm ist das Eosin-Methylenblau, und zwar nicht mit blauvioletter 

 Farbe und grüner Fluorescenz, sondern mit röthlich-violetter Farbe 

 ohne Fluorescenz löslich, aber noch schwerer als im Alkohol. Die übrigen 

 Farben sind in Chloroform aber sehr leicht löslich. Es kann also 

 das Eosin-Methylenblau auch aus Chloroformlösungen durch Concen- 

 triren derselben dargestellt werden. 



Noch verschiedenartiger verhalten sich die Farbstoffe dem Aether 

 gegenüber. Eosin-Methylenblau ist in Aether absolut unlöslich. Me- 

 thylenviolett ist ziemlich schwer, übrigens mit carmoisinrother Farbe 

 und brauner Fluorescenz, in Aether löslich. Leichter löslich mit Him- 

 beerfarbe ist Methylenazur, und ausserordentlich leicht löslich ist der 

 orangene Farbkörper, den ich vorläufig Methyleuorange nennen 

 möchte. Die schwärzliche Substanz ist in Aether ebenfalls unlöslich. 



Bei der Isolirung der Farben bin ich bisher folgendermaassen 

 verfahren: Der erste krystallinische Niederschlag des Eosin-Methylen- 

 blau wird zunächst längere Zeit mit destillirtem Wasser gewaschen. 

 Nach kurzer Zeit wird das Waschwasser hellrosa mit grüner Fluor- 

 escenz. Es ist mir aber nach mehrtägigem Auswaschen bisher nicht 

 gelungen, das Waschwasser absolut farblos zu erhalten. Es kann daher 



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