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celte solution diminue avec le temps ; il faut donc ne faire de ce réactif que 
les quantités dont on a besoin pour quelques jours. 
Eau acidulée. — 580 c.c. d’eau dans lesquels on verse 10 gouttes d’acide 
nitrique, | 
Carbonate de lithium. — 6 à 8 gouttes d’une solution saturée de carbonate 
de lithium dans 10 c.c, d’eau distillée. 
Huile d'aniline et bleu de méthylène. — On broie dans un mortier 4 2 gr. 
de bleu de méthylène dans 10 c.c. d'huile d’aniline; on obtient de cette façon 
une solution saturée ; il reste même au fond un peu de la substance non 
dissoute. Pour se servir de ce liquide, on en ajoute à de l'huile d’aniline un 
nombre de gouttes plus ou moins grand suivant le degré de coloration que 
l'on veut. 
Une chose difficile à voir dans les Bactéries, ce sont les cils vibratiles: 
leur diamètre est extrêmement faible et leur réfringence très voisine de 
celle des milieux dans lesquels on examine habituellement les Bactéries. On 
a eu l'idée d'essayer un double bain, le premier jouant le rôle de mordant, 
comme en teinture, le second le rôle de colorant. Voiei les bains dont se 
sert M. Lœærrrer (1). | 
Mordant. — À 10 c. e. d’une solution aqueuse de tannin à 20 p. 100 on 
ajoute goutte à goutte une solution de suifate de fer, jusqu’à ce qu'on 
obtienne un liquide violet noir, puis on ajoute 3 à 6 c.c. d’une décoction de 
campéche (1 partie de bois dans 8 d’eau), de facon à arriver à une teinte 
violet sale. La solution obtenue peu se conserver plusieurs jours et sa couleur 
pendant ce temps devient de plus en plus foncée. Il faut la conserver dans des 
vases bien bouchés, et elle se conserve mieux quand on à ajouté quelques 
gouttes d’une solution à 5 p. 400 d'acide phénique. 
Colorant. — On colore avec le bleu de méthyle, le violet de méthyle ou la 
fuchsine. On prend environ 100 c.c. d’une solution aqueuse saturée d'aniline, 
on ajoute 4 c. c. d’une solution de soude à 4 p. 100, et c’est au liquide obtenu 
qu’on ajoute 4 à 5 grammes du colorant que l’on veut employer. 
Les milieux de culture sont généralement riches en albumine, et cela est un 
inconvénient parce que l’albumine donne généralement un précipité avec le 
mordant ; il faut donc rendre le milieu pauvre en albumine; pour cela on 
en dilue une petite quantité dans de l’eau distillée, un peu de cette eau 
dans une nouvelle eau distillée et de même deux ou trois fois, et c'est sur le 
liquide obtenu en dernier lieu qu'il faut opérer. 
La lamelle portant le liquide où sont les Bactéries est séchée à l'air 
puis passée à la flamme; on verse le mordant et l'on chauffe à la — 
Jusqu'à ce que le liquide fume faiblement, on reverse l'excès de mordant et. 
l’on filtre sur la lamelle deux ou trois gouttes de colorant ; on chaufle 6 
cement, quand on juge la coloration suffisante on lave et la préparation est 
terminée. : 
M: TRENKMANX (2) conseille pour colorer les cils des Bactéries d'opérer de 
(1) Loœffler : Nouvelle méthode de coloration des microorganismes, surtout mé "1. 
cils el de leurs flagelles (Centralblatt für Bakteriologie und Parasitenkunde, vo iblatt 
} Trenkmann : Die ärbung der Geisseln von Bacillen und Spirillen (Gentra 
für Bakteriologie und Parasitenkunde. vol, VI, 1889). 
