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Ho scelto ad arte questi due lieviti, perchè il primo emette molta invertasi 

 anche in assenza di saccarosio, mentre il secondo, pur invertendo energica- 

 mente questo disaccaride nell'interno delle sue cellule, secerne una quantità 

 assai piccola di invertasi. 



Nel mio Macor stolonifer la maggior parte delle spore non germina af- 

 fatto so saccarosio privo di ogni traccia di glucosio, anche se si fornisce 

 l'azoto in forma di nitrato d'ammonio. Per evitare del resto l'aumento ec- 

 cessivo di acidità, che secondo O'Sullivan è più dannosa a l'invertasi intra- 

 cellulare, che a quella già uscita (1). ho fornito nelle esperienze seguenti 

 tartarato d'ammonio come fonte d'azoto. Allora, se si aggiunge a la soluzione 

 minerale saccarosata una piccola quantità di mosto d' uva, tutte le spore 

 germinano prontamente e si ha in pochi giorni uno sviluppo poderoso, in- 

 sieme ad assorbimento di saccarosio e fuoruscita d'invertasi (2). 



Metodi di cultura. — I lieviti vennero coltivati entro Erlenmeyer da 

 300 cmc, con colmatore ad H.2 SO4 conc, nella stanza di lavoro; il Macor 

 stolonifer entro scatole Koch in termostato a 25°. Ogni cultura ricevette 

 la seguente soluzione: 



Acqua 200 cmc. 



Tartrato d'ammonio crist. ... 2 g. 



Fosfato acido di potassio crist. . 1 » 



Solfato di magnesio crist. . . . 1,05 » (= 0,5 g. di sale anidro) 



Saccarosio crist 8-10 Vo (tenore esatto v. avanti). 



Le culture di Mucor ricevettero inoltre 25 cmc. di mosto d'uva per 

 ciascuna. 



L'acidità libera (10 cmc. di soluzione =8-12 cmc. '/,„ norm. NaOH) ve- 

 niva conferita evidentemente da la sola idrolisi del KH^ POt . Evitai l'ag- 

 giunta di acido libero, per rendere possibile la sterilizzazione senza idrolisi 

 del saccarosio. 



Infatti gli autori lamentano che nella sterilizzazione di soluzioni con- 

 tenenti saccarosio, questo s'inverta parzialmente, tanto per azione dell'acqua 

 bollente (3), come degli acidi che contengono di solito le soluzioni nutri- 

 tizie. Per ovviare a questo inconveniente Pernbach (1. e.) sterilizzava i li- 

 quidi filtrandoli per candela di Chamberland, O'Sullivan aggiungeva sac- 

 carosio sterilizzato a la soluzione nutritizia raffreddata, mentile Butkewitsch 

 lamenta la formazione di hexosio durante la sterilizzazione. 



Io ho adottato il metodo seguente, semplice quanto sicuro: sterilizzo la 

 soluzione nutritizia senza saccarosio, lascio raffreddare, aggiungo il sacca- 



(1) Su l'azione dell'acidità su l'invertasi v. Fernbacii, Ann. Inst. Pasteur, 

 IV, p. 647, (1890); Kamtz, Archiv f. ges. Phys., C, p. 547 (1903). 



(2) Su l'azione stimolante di diverse sostanze su la germinazione v. Pfeffer 

 rhysiologie, II, p. 134 (1901). 



(3) Cfr. Eayman, Zeitschr. f. physik. Chem., XVI, p. 481 (1896); Rayman e' 

 SuLC, Chem. Centr., 1897, II, p. 476; Sulc, Zeitschr. f. physik. Chem.,XXXlU, 

 p. 47 (1900). 



