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rosio solido, porto di novo a 100° per 3 minuti, lascio raffreddare e poi per 

 agitazione sciolgo il saccarosio. Siccome questo durante la sterilizzazione 

 rimane in massima parte solido, e solo a la sua superficie di contatto con 

 il liquido si scioglie formando un denso sciroppo, cosi non accade inver- 

 sione. La ragione di questo fatto è ancora sconosciuta. Il fatto è che la mia 

 soluzione nutritizia senza mosto rimane completamente priva di liexosio dopo 

 la sterilizzazione, anche perchè non contiene acido libero (1). 



La preparazione del lievito per la semina si fa secondo il metodo de- 

 scritto in un altro lavoro (2). Per il Mucor, una forte quantità di spore veniva 

 ripartita in 2 cmc. di acqua stex-ile, di cui versavo 1 cmc. in ognuna delle 

 due culture di ogni esperienza. Nelle culture di micelii occorre sempi-e semi- 

 nare molte spore, per ottenere uno sviluppo rapido ed omogeneo (3). 



Metodi analitici. — La presa dei saggi vien fatta con pipette sterili. 

 Lo zucchero è determinato secondo Allihn, ma il rame precipitato viene poi 

 ossidato a l'aria in CuO. I valori riportati nelle tabelle sono appunto in 

 mg. di CuO, per 10 cmc. del liquido primitivo; una trasformazione in valori 

 di zucchero è per ora inutile; quel che importa è poter confrontare i valori 

 fra loro. Date le ripetute diluizioni, notate anche nelle tabelle, per portare 

 il tenore in hexosio dei liquidi da analizzarsi al prescritto 1 % , non ho 

 mai osservato che il colloide in esperimento impedisse la precipitazione 

 esatta del rame. 



Determino il saccarosio in 5 o 10 cmc. del liquido primitivo, neutraliz- 

 zati, portati a 50 cmc, aggiunti di 5 cmc. di HCl al 5 ° o e tenuti in bagno- 

 maria a 100° per mezz'ora. Dopo il raffreddamento neiitralizzo esattamente 

 con NaOH, indi porto a 50 o 100 cmc, e in 5, 10 o 25 cmc determino lo 

 zucchero. 



Dosamento dell' invertasi. — La quantità presente di invertasi viene de- 

 dotta dal potere invertente del liquido in cui essa si trova. 



Determino l' invertasi esterna (emessa) ponendo per lo più 5, rgj-amente 

 10 cmc. del liquido contenente l'enzima, con 5 risp. 10 cmc. di soluzione 

 al 40% di saccarosio cristallizzato puro. (Kandiszucker), privo di hexosio, 

 in bagno a 57° per un'ora, passata la quale arresto l'inversione con un leg- 

 gero eccesso di NaOH, porto il liquido a 50 cmc e ne prendo 5-25 cmc per 

 determinare l' hexosio formatosi. L'acidità è quindi metà di quella originale. 

 Riportare l'acidità ad un dato optimum, come praticava Eernbach, è inu- 

 tile, perchè non sappiamo quale sia l'acidità intracellulare, a cui evidente 

 mente è adattata ogni invertasi, e del resto non è necessario, se si ha cura 

 che l'acidità originale rimanga sempre assai debole, sopratutto quasi co- 



(1) Anche i sali idroliticamente divisi, come il KHj PO4, invertono il sac- 

 carosio secondo Long, Journ. Amer. Cheìii. Soc, XVIII, p. 120 (1895), ma non 

 nella dose da me adoperata. 



(2) Annali di Botanica, III (1905). Nota riassuntiva in lìendiconti Accad. 

 Lincei, (5), XIV, I Sem., p. 747 (1905). 



(3) Cfr. Pantanelli, Jahrb. f. wiss. Bot, XL, p. 307 (1901). 



