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stante durante le esperienze e pressoché eguale in tutte le colture messe 

 a confronto, come a me difatti è riuscito (v. Tabelle). 



Per determinare Vinvertasi interna del lievito^ sono da rifiutare i metodi 

 basati su l'estrazione di tutta l' invertasi cellulare, per lunga macerazione 

 del lievito in acqua sterile, di cui ban fatto uso Fernbach (1, e) e tutti i 

 chimici, a cominciare da Salkowski fino ad Hafner (1). Infatti, come del 

 resto anche Fernbach ha osservato, l' invertasi si altera rapidamente ap- 

 pena emessa da le cellule. Alcune misure in proposito: 



6,20 gr. di lievito fresco della razza Pane vennero seminati in 200 cmc. 

 della detta soluzione nutritizia, piìi 200 cmc. di mosto d'uva. Dopo 2 giorni di 

 cultura a 25" in termostato (29 aprile-1 maggio 1905) il liquido era affatto 

 privo di zucchero e venne separato dal lievito per filtrazione. Esso conte- 

 neva allora tanta invertasi, quanta corrisponde a 333 mg. di CuO per 

 10 cmc. di liquido originale, ottenuti con il metodo suddetto. Il 1° giorno 

 dopo la filtrazione questo valore scese a 205, dopo 2 giorni a 132, dopo 

 3 giorni a 65, dopo una settimana a 22. 



0' Sullivan ha del resto dimostrato con esattezza, che Pinvertasi soffre 

 assai della perdita dell'optimum di acidità, di cui essa godeva nella cellula. 

 Con il metodo di macerazione si va quindi ben lungi da l'ottenere che tutta 

 l'invertina cellulare spieghi la sua attività. 



Con la plasmolisi in soluzioni concentrate, ma fredde, di saccarosio o 

 di sali, come hanno praticato Gayon (2), Lintner (3), Jssajew (Jt) e Can- 

 non (5), si estrae certamente un' invertasi attiva, ma la quantità che ab- 

 bandona il sacco protoplasmatico, se pure proviene da protoplasti vivi, ciò 

 che mi pare dubbio, è una frazione minima della quantità totale esistente 

 nella cellula. 



Il metodo, che io ho adottato, è ben più rapido ed esatto : 



Il lievito già deposto completamente, viene lavato, per decantazioue a 

 la pompa, 2 volte con 200-400 cmc, di acqua sterile, a distanza di 10 ore; 

 si determina l' invertasi nelle due acque di lavaggio. Poi si ripartisce. bene 

 il lievito in un piccolo volume determinato (25-30 cmc.) di acqua sterile, 

 se ne tolgono 5 cmc. e si addizionano di 5 cmc. della soluzione di sacca- 

 rosio al 407o- S"^ pone subito questa miscela in bagno a 57° e vi si tiene 

 un'ora, agitandola continuamente. Dopo un'ora si an-esta l'invei'sione con 

 un lieve eccesso di NaOH e si determina subito l'hexosio formatosi. — Le 

 cellule, come mostra l'osservazione microscopica, entrano in plasmolisi per 

 la forte concentrazione e muoiono subito per l'elevata temperatura ; il loro 

 contenuto diffonde liberamente nel liquido, il saccarosio penetra nelle cellule, 

 cosi che tutta l' invertasi esistente nelle cellule entra subito in azione, e pre- 

 cisamente a la temperatura e concentrazione di zucchero per essa optimali. 



(1) Zeitschr. f. physiol. Chem., XLII, p. 1 (1904). 



(2) Comptes rendus, CU, p. 978 (1887). 



(3) Centralhl. f. Bakteriol., (2), V. p. 793 (1899). 



(4) Zeitschr. ges'. Brauw., XXIII, p. 796 (1900). 

 (B) Centralbl. f. BakterioL, (2), XII, p. 472 (1904), 



