TOMK III, 1891. 



SUR LES NODOSITÉS RADICALES DES LÉGUMINEUSES. 1 1 1 



lées à l'état de mélange avec le Rhizobium. Mais les cultures pures 

 sont d'un efifet plus sûr, et voici comment j'ai réussi à en 

 obtenir. 



Sur les racines des Pois cultivés dans les solutions nutritives, 

 j'ai coupé quelques fragments pourvus de nodosités pas trop 

 avancées, mais contenant déjà des bactéroides. Je les ai plongés 

 dans une solution de sublimé à i 7o"" ^^^ après dix minutes, lavés 

 à trois reprises avec de l'eau stérilisée à 120°. Les fragments de 

 racines avec leurs tubercules ont ensuite été broyés avec un agita- 

 teur préalablement flambé, quelques gouttes du mélange aspirées 

 avec un tube capillaire ont été introduites dans les milieux de 

 culture. 



Ce procédé m'a paru meilleur que celui que j'avais suivi d'abord, 

 et qui consistait a percer les nodosités stérilisées avec un tube 

 capillaire; souvent, des microbes étrangers pénètrent dans les 

 cultures pendant les manipulations. Un avantage plus important 

 encore, c'est que le broyage permet de mélanger les bactéroïdes 

 d'âges différents, et dont l'aptitude au développement est fort 

 inégale. 



Quant au milieu de culture, je me servais de prime abord de 

 bouillon de Pois gelatinise et additionné d asparagine, d après les 

 indications de Beyerinck. Mais cette substance amidée ne s'est 

 pas montrée bien nécessaire, ni même avantageuse dans des 

 cultures comparatives. 



Sur bouillon de Pois gelatinise, le développement des colonies 

 est assez inégal. On voit côte a côte, et à la surface de la gélatine 

 nutritive, des colonies très petites formées de cellules peu nom- 

 breuses, tandis que d'autres atteignent un diamètre de près d'un 

 millimètre. Cette différence tient sans aucun doute à l'état physio- 

 logique des bactéroïdes au moment de l'ensemencement. Les plus 

 petites colonies sont arrondies, les plus grandes m'ont présenté 

 plusieurs fois des contours sinueux qui rappellent les colonies de 

 la forme-levure de Cladosporium, que j'ai figurées naguère dans 

 les Annales de l'Institut Pasteur (t. 11, p. 584; voir pi. II, fig. 12). 



Ces formes de développement sont très rares; je me suis assuré 

 quelles étaient bien dues au Rhizobiuni, par le procédé des inocu- 



