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Al momento di eseguire l'isolamento si versa la gelatina lique- 

 fatta in 4 scatole di Petri sterilizzate e vi si lascia solidificare. 

 Come ho detto, si porta, con una pipetta sterile, qualche goccia del- 

 l'emulsione batterica su una di queste piastre e si distende su tutta 

 la superficie della gelatina per mezzo di una spatola di vetro (serve 

 bene p. es. la spatola del Drigalski o altra consimile secondo ho ri- 

 cordato nella mia precedente memoria). La spatola stessa, senza ca- 

 ricarla ulteriormente di materiale, viene senz'altro sfregata su tutta 

 la superficie della gelatina della seconda capsula ove abbandona il li- 

 quido di cui era rimasta intrisa nella prima capsula : dalla seconda 

 si passa nella terza, da questa nella quarta sfregando sempre accu- 

 ratamente ogni punto della gelatina. Le capsule vengono poi poste 

 in termostato a temperatura di 15-18'', e a partire dal secondo giorno 

 si sorvegliano giornalmente sottoponendole ad esame macro-e mi- 

 croscopico (a piccolo ingrandimento : 30-40 diametri). 



Per lo più già dopo 36-48 ore sono visibili ad occhio nudo nella 

 prima capsula colonie fondenti o no, evidentemente dovute a germi 

 inquinanti: talvolta mancano, ma .tal' altra sono cosi abbondanti e 

 cosi rapidamente crescenti da invadere tutta quanta la gelatina o 

 da fluidificarla prima che il microrganismo tubercoligeno possa dar 

 luogo a formazione di colonie, anche microscopiche. Naturalmente 

 tali colonie inquinanti sono più scarse (di rado mancano) nella 

 2», piastra; scarsissime o mancanti nella terza e nella quarta. 

 Astrazione facendo da queste colonie inquinanti, e quando il loro 

 troppo rapido e rigoglioso sviluppo non occupa o fonde rapidamente 

 la gelatina, le culture per lo più nei primi giorni dopo l'innesto 

 non mostrano alcuna modificazione: ma verso il 5°-6° giorno l'esame 

 microscopico (a 30-40 diametri) fa vedere la superficie della gelatina 

 cosparsa di punticini (il cui numero va decrescendo dalla 1^ piastra 

 ove sono numerosissimi, verso la 4'' la quale talvolta ne è afi'atto 

 priva) fortemente rifrangenti la luce, che all'esame diretto a forte in- 

 grandimento, o nei preparati per impressione appaiono costituiti da 

 corpiciattoli irregolari, globosi, piriformi, bacillari, ramificati. E que- 

 sta la prima formazione della colonia, di cui nella mia memoria più 

 volte citata, ho dato la riproduzione microfotografica. 



Ma a volte si ha un reperto assai diverso, il quale mi sembra ci 

 dia la chiave di molti degli errori e delle incertezze che hanno finora 

 cosi stranamente complicato la questione dell'isolamento del mi- 

 crorganismo produttore dei tubercoli. Si può cioè avere lo sviluppo 

 relativamente rapido di colonie che per i loro caratteri macroscopici 



