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si trovi inizialmente mescolato coi microrganismi produttori della 

 colonia a rapido sviluppo, sia che questa, per la costipazione del ma- 

 teriale sparso sulla superficie della gelatina, venga'' nel suo accresci- 

 mento in contatto con germi estranei che poi nelPeseguire il tra- 

 pianto vengono trasportati dall'ansa di platino, questo è certo, che 

 le culture derivanti da tali colonie non offrono nessuna garanzia di 

 purezza, mentre possono molto facilmente trarre in inganno chi si 

 contenti di esaminarle nei primissimi passaggi. 



È chiaro che tale inconveniente non può verificarsi se F isola- 

 mento della cultura si fa da colonie a lento sviluppo e dalle piastre 

 ove esse non sono troppo numerose. Anzitutto (come dimostra l'e- 

 same microscopico diretto, secondo ho esposto nella memoria prece- 

 dente) le colonie a lento sviluppo derivano dalla moltiplicazione di 

 uno solo o di pochissimi germi vicini, e ciò, secondo un canone fon- 

 damentale della tecnica batteriologica è già una condizione favore- 

 vole alla loro purezza: ma ciò che ha speciale importanza è che la 

 loro stessa lentezza di sviluppo ci offre una valida garanzia inquan- 

 tochè l'eventuale presenza di germi inquinanti ha intanto la mas- 

 sima probabilità di manifestarsi o con formazione della relativa co- 

 lonia, con evidente inquinamento della colonia tubercoligena. E 

 l'esperienza di molte e molte diecine di passaggi, dimostra, dopo 

 tutto, che in tali condizioni si è quasi sempre sicuri di ottenere la 

 cultura pura, che solo eccezionalmente può aversi dalle colonie a ra- 

 pido sviluppo. 



Quindi, mentre cade ogni contraddizione tra la mia asserzione di 

 una caratteristica lentezza di sviluppo del microrganismo tuberco- 

 ligeno e quella di molti altri autori che parlano di svi-luppo assai 

 rapido (e non accenno con ciò a quelli pure numerosissimi che hanno 

 avuto addirittura a che fare con colonie inquinanti), viene messa 

 in chiara luce una gravissima causa di errore in cui la maggior 

 parte di questi autori sono caduti ottenendo culture per lo più im- 

 pure, e che solo talvolta possono essere state pure. E dopo ciò non 

 appare verosimile la mia ipotesi che eaiche quello che 1' Hiltner con- 

 siderava, in base ad un esame affrettato, come un germe inquinante, 

 fosse in realtà la cultura più sicuramente pura del microrganismo 

 radicicola ? 



Concludendo, V isolamento del microrganismo deve farsi dalle 

 ]DÌastre ove, al 5'-6* giorno dopo l' innesto esistono, e non troppo nu- 

 merose, coloniette ancora invisibili ad occhio nudo e che ad un in- 

 grandimento di 30-40 diametri si presentano come piccoli punticini 



