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Gli esperimenti sono stati fatti con culture di 5^-8° passaggio; 

 10 12 giorni prima di quello della semina facevo un passaggio per 

 strisciamento in una provetta di gelatina di leguminose, solidificata 

 a becco di flauto, che a temperatura di 16^-18^ nel periodo di tempo 

 riaordato dava uno sviluppo assai rigoglioso. 



Sono note le idee dell' Hiltner (1) circa le precauzioni da aversi 

 nell' infettare i semi colle culture. Egli ritiene che non convenga me- 

 scolare la cultura con terra da spargersi poi nel suolo, perchè in tali 

 condizioni l' infezione dei semi non si verificherebbe che eccezio- 

 nalmente. Egli crede poi che nella germinazione dei semi, sulla 

 superficie di questi si producano speciali sostanze dotate di potere 

 battericida o tali almeno da ostacolare lo sviluppo dei microrga- 

 nismi e da impedire quindi la formazione dei tubercoli. Perciò egli 

 attribuisce almeno in parte l'insuccesso delle inoculazioni colla 

 nitragina alla pratica primitivamente consigliata di bagnare con 

 essa i semi immediatamente prima della semina; per evitare tale 

 inconveniente egli consiglia o di eseguire l' inoculazione dei semi 

 dopo che questi sono stati fatti germogliare su sabbia umida, o di 

 bagnare i semi prima della semina, ma con una diluizione della ni- 

 tragina fatta non in acqua semplice, ma in acqua coli' 1 ^'^ di glu- 

 cosio e di peptone, oppure in latte. Senza stare qui a discutere tali 

 affermazioni, noto che i miei esperimenti sono stati eseguiti con 

 varie modalità corrispondenti alle diverse condizioni indicate dal- 

 l' Hiltner. Ho usato cioè come materiale di inoculazione: 



a) la patina batterica di 10-12 giorni asportata dalla cultura e 

 diluita in tanta acqua quanto era necessaria per bagnare i semi ; 



b) la patina batterica diluita in acqua coli' 1 % ^i glucosio e 

 1' 1 7o di peptone ; 



e) tutto quanto il materiale della cultura (gelatina e patina 

 batterica) liquefatta mediante immersione in bagno maria a 30°-32** 

 e allungata poi con la quantità opportuna di acqua. 



I semi talvolta furono bagnati colla diluizione della cultura al 

 momento della inoculazione ; tal altra furono bagnati previo germo- 

 gliamento appena iniziato, altra volta furono tenuti per 48 ore a con- 

 tatto colla diluizione della cultura ottenendosi cosi il germogliamento 

 a contatto con essa. 



È inutile dire che i singoli esperimenti furono sempre eseguiti 

 comparativamente con semi non inoculati, adoprando ugual numero 



(1) Cfr. Hiltner e altri: varie memorie nel già citato fase. 3 voi. Ili de- 

 gli Arb. a. d. Biolog. Abt. f. Land. u. Forstw. ecc. 1903. 



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