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Esperimento III. — Volendo pormi nelle condizioni sperimen- 

 tali riferite dal Maze, eseguii anzitutto un esperimento con agar 

 preparato secondo le sue indicazioni. Egli, come già ho detto, non 

 precisa la proporzione di semi di fagiolo da lui usata per prepa- 

 rare il brodo, ma dice che questo conteneva Vjoooo ^^ azoto. Facendo 

 bollire per 1 ora 100 gr. di fagioli in 1 litro di acqua di fonte ot- 

 tenni un liquido che conteneva, in 10 cmc, gr. 0,0049 di azoto: 

 quindi lo utilizzai aggiungendovi il 2 °/o di saccarosio, l'I % di clo- 

 ruro di sodio e solidificando coli' 1,6 °/o di agar, colla solita tecnica. 

 Ma senza stare a descrivere minutamente l'andamento dell'esperi- 

 mento, dico subito che, al termine di esso, constatai con molta mia 

 meraviglia che le culture avevano dato esito completamente nega- 

 tivo. Solo più tardi (come già ho detto) constatai che lo stesso Maze 

 afferma che basta già un contenuto del 5 Voo di cloruro di sodio 

 per ostacolare lo sviluppo del microrganismo specifico. In realtà, 

 nemmeno questa asserzione del Maze può ritenersi assolutamente 

 esatta, poiché né il 0,5 7^, e nemmeno l'I % di Na CI ostacola di 

 per se solo lo sviluppo del microrganismo tubercoligeno, se il terreno 

 di cultura non é già troppo ricco di sali. Ma nell'agar preparato nel 

 modo or ora ricordato (la cui composizione è esattamente quella 

 del substrato nutritivo sul quale il Maze nella sua prima memoria 

 asserisce di avere constatata la capacità azoto-' fìssatrice della cultura 

 pura del radicicola), la presenza dell'I V^ di Na CI rende talvolta 

 nullo, talvolta scarsissimo lo sviluppo del microrganismo dei tuber- 

 coli. 



Pertanto io ripetei l'esperimento riducendo il cloruro di sodio al 

 0,25 %:ragarfu distribuito (col solito sistema della doppia pesata) in 

 6 palloni a lungo collo del volume di circa 250 cmc. (circa 15-20 gr. 

 per ciascun pallone). Dopo sterilizzazione e solidificazione dell'agar, i 

 6 palloni furono infettati con culture da fava, pisello, trifoglio (di 

 4''-6°-4° passaggio), versando in ciascuno di essi \/\g di cmc. di una 

 emulsione in acqua sterile della rispettiva cultura e distendendola 

 sulla superficie dell'agar per mezzo di un'apposita spatola di vetro 

 a lungo manico. Due palloni furono poi nuovamente sterilizzati. Fi- 

 nalmente il tappo di ovatta di ciascun pallone fu sostituito con un 

 tappo di gomma a due fori con doppia tubulatura di vetro portante 

 appositi tubi di gomma (il tutto previamente sterilizzato nella 

 stufa di Koch con l'opportuna protezione di carta e di ovatta) in 

 modo da potere congiungere i sei palloni in un sistema unico che 

 messo in rapporto coll'aspiratore e coi mezzi di purificazione del- 

 l'aria (in modo identico a quello del precedente esperimento) fu te- 

 nuto per 30 giorni a temperatura di 20°-25'', all'oscuro, in corrente 

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