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Questo alla sua volta penetra in uno dei due fori del tappo di 

 gomma v del pallone d; il secondo foro del tappo v porta un altro 

 tubo di vetro e piegato ad angolo retto, a cui può innestarsi un 

 tubo di gomma a grosse pareti chiudibile per mezzo di una morsa 

 a pressione e che può innestarsi ad una macchina pneumatica. Il 

 j)allone d della capacità di circa 500-600 cmc. è di vetro di Iena, e 

 a colJo lungo. L'apertura superiore del tubo a si chiude con un 

 grosso batuffolo di ovatta; un altro batuffolo s'introduce nel ramo 

 orizzontale del tubo e dopo averne staccato il tubo di gomma; lo 

 apparecchio cosi preparato, e avvolto in carta, si sterilizza ponen- 

 dolo per 1 ora nella stufa di Koch a 100°. Una volta completa- 

 mente raffreddato, si raccomanda ad uno stativo h e quindi, dopo 

 aver chiuso il rubinetto del tubo i si versa in a, scostando il meno 

 possibile il batuffolo di ovatta, una certa quantità di brodo di fa- 

 gioli sterilizzato, fino a 1 cm. circa al di sopra della candela fil- 

 trante. Agendo con sveltezza e precauzione, in un ambiente ove 

 l'aria sia calma e scarsa di pulviscolo, si può eseguire il travaso del 

 liquido senza averne quasi mai a lamentare l'inquinamento. La 

 quantità di liquido versato in a si determina esattamente col so- 

 lito mezzo della doppia pesata. 



Il liquido fu infettato con una traccia di cultura di 4* passaggio 

 da veccia: l'apj)arecchio fu tenuto in ambiente oscuro, a tempera- 

 tura di circa 20°. Dopo 8 giorni, il liquido essendo discretamente 

 intorbidato, l'apparecchio fu congiunto per mezzo del tubo e ad una 

 macchina pneumatica, e, mantenendo chiuso il rubinetto i, fu pra- 

 ticata una certa rarefazione dell'aria nel pallone d (non oltrepassai 

 una depressione corrispondente a 20 cm. di mercurio); quindi, essen- 

 dosi aperto il rubinetto 2, il liquido contento in a filtrò abbastanza 

 presto (in 1 ora circa) nel pallone d. Richiuso allora il rubinetto i si 

 tornò a versare una certa quantità di brodo di fagioli (esattamente 

 determinata colla doppia pesata) nel recipiente a e cosi di seguito. 

 Al 15" giorno fu fatta una seconda filtrazione, al 20° una terza. Pri- 

 ma di questa si fece l'esame microscopico del liquido fortemente torbi- 

 do, risultandone la apparente purezza della cultura. Terminata la 3* 

 filtrazione, il recipiente a fu per 2 volte riempito con acqua distil- 

 lata che, fatta filtrare a sua volta, trasportò nel recipiente d le pic- 

 cole quantità di liquido nutritivo rimaste in a e nella porosità 

 della candela. Allora la parte superiore dell'apparecchio fu staccata 

 dal pallone d allontanandola da esso insieme col tappo v; nuova 

 acqua distillata fu versata in e, e coll'aiuto di una bacchetta di vetro 

 coll'estremità rivestita di gomma si mise in sospensione in essa il 

 materiale batterico rimasto aderente alle pareti del recij^iente e 



